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混合模式吸附层析技术(Mixed-mode adsorption chromatography)是近年来发展的一种新型生化分离技术。混合模式吸附剂的功能配基同时含有疏水基团和离子交换基团，兼具疏水作用和静电相互作用，可以通过静电相吸来强化吸附或静电排斥来协助解吸。另外，配基密度通常比较高，具有典型的耐盐吸附特性，可以不需要调节原料液的离子强度直接层析分离，减少分离步骤，提高分离效率。本文重点研究了两种混合模式吸附剂—Streamline Direct HST和MEP HyperCel，考察了模型蛋白的吸附规律和影响因素，探讨了相关的吸附机理，并将混合模式吸附层析应用于卵黄抗体的分离纯化，达到了较好的分离效果。主要内容可分为以下四个方面：(1)Streamline Direct HST对模型蛋白的静态吸附。以牛血清白蛋白(BSA)和牛血红蛋白为模型蛋白，考察pH和盐浓度对Streamline Direct HST吸附蛋白质的影响。结果表明，Streamline Direct HST对蛋白质的吸附随pH的变化而变化，存在最适pH使得吸附容量最大，蛋白质分子体积的变化在一定程度上会影响吸附容量。当蛋白质与吸附剂存在静电吸引作用时，吸附过程由静电相互作用主导，吸附等温线符合Langmuir吸附方程；当存在静电排斥作用时，吸附等温线则呈现典型的多分子层吸附模式。(2)Streamline Direct HST分离卵黄抗体。结果表明，在pH4-6范围内Streamline Direct HST对卵黄稀释液中大多数蛋白质都有较强的吸附能力，盐浓度对卵黄抗体吸附的影响很小，改变pH可以实现蛋白质洗脱。由于Streamline Direct HST对卵黄抗体的选择性不高，通过改变上样pH和洗脱条件难以实现卵黄抗体的有效分离。(3)MEP HyperCel对模型蛋白的静态吸附。以溶菌酶和BSA为模型蛋白，HCIC吸附剂MEP HyperCel对蛋白质的吸附呈现复杂的规律。MEP HyperCel在pH 6-12间对溶菌酶都有吸附，吸附容量随着pH的增加而增加。结果表明，pH是影响MEP HyperCel吸附蛋白质的主要因素。MEP HyperCel对蛋白质吸附能力强，可能造成洗脱困难，实验中无法实现MEP HyperCel对血红蛋白的有效洗脱。(4)MEP HyperCel分离卵黄抗体。结果表明MEP HyperCel对卵黄抗体具有良好的吸附选择性。通过分离条件的优化，MEP HyperCel一步分离卵黄抗体纯度达到95％以上。MEP HyperCel吸附具有耐盐特性，因此可以与盐析过程相结合，盐析沉淀重新溶解后直接MEP HyperCel层析分离，电泳分析IgY纯度可达到99.8％，实现了卵黄抗体的高效分离。通过本文研究，揭示了典型混合模式吸附剂吸附蛋白质的一些规律，为开发新型混合模式吸附剂和分离过程优化提供了有益的指导。采用疏水性电荷诱导层析介质MEP HyperCel，实现了卵黄抗体分离的高效分离，单步纯化因子高，为进一步抗体分离的应用打下了一定基础。