【摘 要】
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第一部分头皮复合细胞悬液制备方法的研究研究目的：研究应用成人头皮快速制备复合细胞悬液,包括表皮细胞(EC)和成纤维细胞(FB),以及复合细胞合适混合比例。实验方法：1.以酶解法
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第一部分头皮复合细胞悬液制备方法的研究研究目的：研究应用成人头皮快速制备复合细胞悬液,包括表皮细胞(EC)和成纤维细胞(FB),以及复合细胞合适混合比例。实验方法：1.以酶解法消化成人头皮,获得复合细胞。2.分四组培养细胞,A组：EC/FB(1／0)；B组：EC/FB(0／1)；C组：EC／FB(2／1)；D组：EC/FB(6／1)。3.以复合法快速消化成人头皮,获得复合细胞。研究结果：1.酶解法消化成人头皮,可以获得复合细胞(包括表皮细胞和成纤维细胞)。2.C组细胞增殖最快,但成纤维细胞过度增殖；D组细胞增殖速度比B组慢,比A组快,表皮细胞适度增殖。3.复合法消化成人头皮,与酶解法相比,所得细胞总数、存活率以及CD29、K19阳性细胞比例无统计学差异；复合细胞比例接近D组EC／FB(6／1)比例,细胞增殖速度明显增快。结论：复合法消化成人头皮,与酶解法相比,耗时更少,所得复合细胞比例更合适,增殖速度更快。第二部分复合细胞结合人工真皮快速构建组织工程皮肤的初步研究研究目的：研究复合细胞接种于人工真皮的效果,多方面检测细胞生长情况。实验方法：将复合法所得原代复合细胞接种于人工真皮表面构建组织工程皮肤,进行HE染色、扫描电镜检测、免疫组化(PAN-CK、VIMENTIN、CD29、K19)染色,观察细胞在人工真皮上生长情况。研究结果：接种6天后,复合细胞在人工真皮内增殖,细胞中PAN-CK、VIMENTIN、CD29、K19各有阳性表达。结论：复合法所得原代复合细胞接种于人工真皮,体外培养6天可大量增殖,初步获得组织工程皮肤。
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