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背景 贲门腺癌作为消化道恶性肿瘤之一,其发病率呈逐年上升趋势。由于贲门腺癌临床上缺乏有效的早期诊断指标,造成贲门腺癌患者大多数在就诊时,肿瘤已发生转移,临床预后差。因此,深入研究贲门腺癌发生、发展中基因表达情况,对贲门腺癌的早期诊断、治疗及预后有重要的意义。干扰素诱导基因2(IFN-induced protein with tetratricopeptide repeats 2,IFIT2)作为IFIT家族的成员之一,具备了抵御病毒感染、免疫调节、抵御细胞转移和促细胞凋亡等生物学特性。相比IFIT2在抗病毒方面作用研究,该基因在抗肿瘤方面,报道较少,特别是在责门腺癌未见报道。本研究旨在检测IFIT2在贲门腺癌的表达情况及临床意义。目的通过三种实验方法检测IFIT2在贲门腺癌及癌旁组织中的表达情况以了解IFIT2在贲门腺癌发生、发展及诊疗中的作用。探讨可否将IFIT2作为监测责门腺癌早期诊断、靶向治疗及判断预后的重要指标之一。方法采用随机抽样的方法,选取2012.02至2013.10间在河南科技大学第一附属医院接受贲门癌根治术的贲门癌患者手术标本60对(包括癌和癌旁组织),其中,男31例,女29例。通过免疫组织化学及Western blotting方法分别从定性及定量两方面检测IFIT2在贲门腺癌及癌旁组织中的表达差异,运用实时荧光定量RT-PCR技术从mRNA层面来检测IFIT2在贲门腺癌及癌旁组织中的表达差异。应用SPASS17.0统计软件,分析IFIT2在癌与癌旁表达差异,进一步分析与贲门腺癌患者性别、临床病理分化程度、临床分期的关系。结果 1.免疫组织化学的方法：显示IFIT2在60例贲门腺癌的表达阳性率为25%(15/60),在癌旁表达阳性率为70%(42/60)。IFIT2基因在癌组织和癌旁组织中的表达有统计学差异(P<0.001); IFIT2阳性表达与肿瘤分化程度具有显著的统计学差异(x2 P = 0.015)。IFIT2基因在癌组织中的表达及癌旁组织中的表达与患者性别无统计学意义(χ2,P=0.881,P=0.338),亦患者临床分期(TNM)均无统计学意义(χ2,P=0.563,P=0.884)。2. Western-blotting方法验证：我们在所收集的60对标本中,随机选取8对标本,利用Western-blotting方法验证IFIT2基因在癌组织和癌旁组织中的差异表达情况。Western-blotting结果先由凝胶成像系统(721BRO05922型,美国BIO-RAD公司)扫描,凝胶成像系统显示IFIT2蛋白大小约为60KDa,以蛋白大小为48 KDa的tublin作为内参,再由凝胶图像image软件分析测得癌和癌旁表达条带的灰度值,结果经Wilcoxon符号秩和检验,提示IFIT2基因在癌组织和癌旁组织中的差异表达有统计学意义(Z=2.474,P=0.018)。3.实时荧光定量RT-PCR技术验证：对所收集的60对标本中,随机选取30对标本,通过primer 5软件设计引物,应用实时荧光定量PCR仪对IFIT2基因在30对贲门腺癌肿瘤组织和癌旁正常组织中的差异表达情况的进行了扩增、分析、验证,得出IFIT2基因在贲门腺癌和癌旁组织中经PCR检测的Ct值,以GAPDH为内参,根据定量PCR结果的计算公式计算贲门腺癌肿瘤组织和癌旁正常组织中DNA的相对表达量2-△Ct,并且△Ct= (Ct IFIT2 — CtGAPDH)。经t检验,IFIT2基因在癌组织和癌旁组织中的差异表达有统计学意义(t=3.954,P<0.001)。结论1. IFIT2在贲门腺癌及癌旁的表达有统计学意义,提示其在贲门腺癌发生发展中起到抑癌基因的作用；2. IFIT2与贲门腺癌的分化程度有关,提示IFIT2的缺失可能参与了贲门腺癌的发生发展；3.尚不能认为IFIT2基因与贲门腺癌的TNM分期,及肿瘤进展程度有关。