本文对鲫鱼（Carassius cuvieri）未成熟的卵细胞进行玻璃化冻存，比较了三种不同的卵细胞分离方法的效果，分析了不同预平衡时间和温度对鱼卵细胞存活率的影响，筛选出最佳预平衡方法。通过对玻璃化冻存后鱼卵细胞的存活率、琥珀酸脱氢酶（SDH）活性、超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量的检测，筛选出适合鱼卵细胞玻璃化冻存的玻璃化溶液配方及程序，并分析玻璃化冻存对鲫鱼卵细胞的影响。（1）卵细胞分离方法的选择：比较卵细胞经三种不同方法分离后的存活率及成熟率，表明酶消化法是一种简单快速地分离鱼卵细胞的方法，胶原酶因其特异性地水解胶原蛋白，而不损伤其它蛋白质和组织的特点更适合于鱼卵细胞的分离，其最适浓度和时间分别为0.4mg·mL^-1和10min。（2）预平衡时间及温度的选择：卵细胞经三步预平衡、洗脱后检测存活率，发现细胞存活率基本随平衡时间的延长而降低，0℃下预平衡更优于20℃。分析表明，在0℃下以各步平衡时间为10min进行三步平衡效果较好。（3）玻璃化溶液的筛选：分析经不同玻璃化溶液冻存后的卵细胞，检测相关生理生化指标，表明玻璃化冻存液VS4和VSd组的冻存效果较好，其组分分别为160g·L^-11,2-丙二醇，100g·L^-1二甲基亚砜，150g·L^-1甲醇，120g·L^-1乙酰胺，0.6mol·L^-1蔗糖和30g·L^-1聚乙二醇；180g·L^-11,2-丙二醇，110g·L^-1甲醇，0.1mol·L^-1海藻糖和40g·L^-1聚乙二醇。（4）玻璃化冻存对鱼卵细胞结构和功能的影响：对冻存后鱼卵细胞的存活率、SDH活性、SOD活性和MDA含量等进行了初步研究，分析各项检测指标发现，细胞活性随着冻存天数的延长而逐渐下降，细胞膜受损程度逐渐上升，在冻存6d后，趋势减弱。说明玻璃化冻存仍不能完全避免低温对鱼类卵细胞造成的冷冻损伤。上述实验结果表明，以胶原酶消化法分离鲫鱼卵细胞，将其在0℃下以各步平衡10min进行三步预平衡，辅以玻璃化溶液VS4或VSd，采用玻璃化冷冻法、37℃快速复温和蔗糖逐步洗脱等方法，可获得较好的冷冻效果。