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目的:本研究以不同浓度花青素对支气管上皮细胞进行预处理,利用过氧化氢建立氧化应激模型,探讨花青素对过氧化氢诱导气道上皮细胞凋亡的作用以及可能的作用机制。方法:利用过氧化氢对人支气管上皮样细胞I6HBE进行处理,诱导氧化应激模型的建立。1.MTT法检测花青素对过氧化氢诱导的16HBE细胞活性抑制的影响;2.16HBE细胞内装载DCFH-DA探针,流式细胞术检测花青素对细胞内活性氧(ROS)水平的影响;3.比色法检测细胞内丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性的变化;4.Hoechst33342染色荧光显微镜下观察细胞凋亡情况;5.细胞内装载JC-1探针,检测细胞内线粒体膜电位变化;6.Western Blot法检测细胞内抗凋亡蛋白bcl-2和促凋亡蛋白bax表达水平的变化;PTEN蛋白的表达、AMPK以及AKT磷酸化水平的变化。结果:1.MTT结果表明,过氧化氢能够抑制16HBE细胞活性,并呈浓度依赖性;125gg/ml和250μg/ml的花青素能够明显上调过氧化氢处理后的细胞活性(P<0.05);2.花青素和抗氧化剂NAC能够明显抑制过氧化氢诱导的16HBE细胞内ROS和MDA含量升高以及SOD和GPx活性下降(P<0.05);3.Hoechst33342染色结果表明花青素和抗氧化剂NAC能够明显抑制过氧化氢诱导的细胞凋亡;4.JC-1线粒体膜电位检测结果表明,花青素和抗氧化剂NAC能够明显抑制氧化应激诱导的线粒体膜电位降低;5.WB结果表明,过氧化氢处理组细胞内AMPK磷酸化水平明显升高,PTEN表达升高,AKT磷酸化水平明显下降(P<0.05):线粒体保护剂SS-31处理后,细胞内AMPK磷酸化水平明显降低(P<0.05):花青素处理后,AMPK磷酸化水平明显降低,PTEN表达减少,AKT磷酸化水平升高(P<0.05);AMPK抑制剂Compound C处理后,PTEN表达减少,AKT磷酸化水平升高(P<0.05);6.WB结果表明,经过氧化氢处理的细胞中,花青素或Compound C处理后均能明显提高bcl-2表达,降低bax表达(P<0.05);加入LY294002与花青素或Compound C共同对细胞进行处理,能明显抑制bcl-2表达,上调bax表达(P<0.05)。结论:花青素能够抑制过氧化氢诱导的16HBE细胞氧化应激和凋亡,其作用机制可能是通过抑制氧化应激诱导的AMPK激活从而调控PTEN/AKT信号通路。