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构建和表达乙肝表面抗原(HBsAg)突变体用于HBsAg抗原性的深入研究。利用定点突变技术构建HBsAg突变体，然后转化毕赤酵母GS115，菌落PCR、高浓度Zeocin抗性筛选鉴定转化子，表达产物经SDS-PAGE分析和Western blot分析，镍柱纯化，获得一定纯度的蛋白，利用AxSYM HBsAg V2(Abbott)酶免试剂盒检测重组表面抗原的活性。
通过序列分析确定突变体构建成功，SDS-PAGE显示突变体能在毕赤酵母中有效表达，在Western blot试验中HBsAg突变体被特异性多克隆抗体识别，相对分子质量约(Mr)为38 kD，多家市售试剂盒对重组乙肝表面抗原突变体的检测能力存在一定差异：Abbott的AxSYM．HBsAg V2试剂盒能够检测出本文所表达的10种重组乙肝表面抗原突变体，而部分市售试剂盒则对部分突变体如G145R、T126S等突变体漏检。利用毕赤酵母表达系统高效表达出具有一定免疫反应性的HBsAg突变体，对于目前市售试剂盒的质量控制有较高的实用价值。