【摘 要】
:
论文分为三部分。第一部分为DNA的纯化研究,先研究了硅藻土在质粒DNA纯化上的应用,系统研究了硅藻土各项指标对质粒DNA纯化的影响,最后将硅藻土纯化应用于果树基因组DNA提取
论文部分内容阅读
论文分为三部分。第一部分为DNA的纯化研究,先研究了硅藻土在质粒DNA纯化上的应用,系统研究了硅藻土各项指标对质粒DNA纯化的影响,最后将硅藻土纯化应用于果树基因组DNA提取和纯化;第二部分为应用PCR法从橙基因组文库筛选番茄红素β环化酶等位基因2(LCY-b2);第三部分为已筛选番茄红素β环化酶等位基因1(LCY-b1)的上游序列分析。研究取得了以下主要结果。 1.研究表明,沉降速度为6cm/min、1cm/min和0.25cm/min的硅藻土颗粒的DNA吸附能力约分别为0.009μg/mg、0.3μg/mg和2.5μg/mg。沉降速度为0.25—1cm/min的硅藻土颗粒可应用于DNA纯化。为吸附1μgλDNA,以加入20μl硅藻土悬浮液(约含10mg硅藻土颗粒)最为合适,回收率达77.31%。 2.应用改良硅藻土法纯化—长为14953bp的低拷贝质粒pLZ14,所得质粒纯度达23.87%,比未纯化前提高了11.06倍,经纯化的pLZ14质粒测序信号强、无误认碱基,而未经纯化的质粒测序时信号弱、错误普遍存在。应用硅藻土法我们成功去除脐橙果肉,多酚含量较高的多年生果树老叶中杂质,得到纯度和含量均较高的DNA。获得的DNA凝胶电泳条带清晰,无拖尾和明显滞留。 3.根据部分番茄红素D环化酶等位基因2(LCY-b2)设计特异引物,通过特异引物与通用引物配对筛选得到了仅在文库和基因组DNA上扩增的引物。该引物应用于文库筛选时发现,目标噬菌体稀释铺板后,PCR条带变弱,推测其繁殖能力明显弱于噬菌体文库的平均值,本研究通过多种方法优化筛选,提高目标噬菌体的繁殖能力,提高了目标噬菌体在筛选过程中出现的几率,为继续筛选打下了基础。 4.将已筛选的含番茄红素β环化酶等位基因1(LCY-b1)的噬菌体提取纯化后测序获得其上游区序列,应用启动子软件和数据库分析该序列,得到其理论上的启动子结合位点,为进一步的研究提供理论支持。
其他文献
Radiation effects on complementary metal-oxide-semiconductor (CMOS) active pixel sensors (APS) induced by proton and γ-ray are presented.The samples are manufa
It has been recently demonstrated that negative-index dispersion and mode degeneracy can be achieved by manipulating a spoof-insulator-spoof (SIS) waveguide.In
对02428、cpslo17、培矮64在三系杂交稻中的利用进行分析,结果表明,亲和力高低依次为cpslo17、培矮64、02428。cpslo17、培矮64含有对籼粳不育系的恢复基因,02428含有对粳稻
We provide an effective method to investigate the field gradient effect in nanoconfined plasmon-matter interaction.Aligned ultralong SWNTs without defects were
In this work,a double-gate-all-around tunneling field-effect transistor is proposed.The performance of the novel device is studied by numerical simulation.The r
刺梨(Rosa roxburghii Tratt)属蔷薇科蔷薇属植物.其果实肉脆、甜酸、具浓郁的特殊香味,被誉为水果中的"Vc 之王";其防癌、抑癌和抗衰老等保健作用在国内外引起很大关注.但有
青龙县满族自治县农业技术推广站,1989年春引进谷子新品种豫谷2号,当年在青龙镇拉马沟村进行品比试验。通过田间观察和室内考种表明,豫谷2号不论在植株长势,还是生育及经济
我所举办两期上市公司股权分置改革研讨班为进一步推动股权分置改革全面、深入开展,帮助上市公司解决股权分置改革中的实际问题,我所于7月16日至17日在深圳举办了上市公司股
Recently, 5d transition metal iridates have been reported as promising materials for the manufacture of exotic quan-tum states. Apart from the semimetallic grou