禽流感是由A型流感病毒引起的禽类传染病。该病流行已有数百年历史，其损失数不胜数。自1997年我国香港地区暴发禽流感，并发生H5N1亚型AIV致人死亡之后，该病毒致人死亡的事件频频发生。目前，我国防控HPAI的有效途径是注射油乳剂灭活疫苗。但该疫苗一是免疫后机体形成有效抗体滴度的间隙期较长，不能满足紧急情况下快速建立免疫保护的要求；二是油佐剂刺激性大、难吸收，在肉禽宰杀销售之时仍有部分油佐剂残留于机体，严重影响产品质量。因此，寻求替代油佐剂的佐剂，填补现行禽流感灭活油苗的缺陷已成为迫切需要。近几年来纳米技术出现给问题的解决带来了曙光。在重庆市攻关项目的支持下，本课题系统的研究了纳米铝的制备、纳米铝与禽流感抗原的配比及最佳吸附率、纳米铝禽流感灭活疫苗的安全性及对禽类的免疫效果及机制。本文观测了自制纳米铝禽流感(H5N1)疫苗对肉鸡的免疫效力。 动物的分组与处理： 1日龄荣昌青脚肉鸡500只，常规饲养，自由采食至10日龄时，检测母源抗体，将240只母源抗体水平为3log2的雏鸡按母源抗体一致性原则分入4组。14日龄时各组鸡左胸肌肉注射免疫物0.5ml/只。Ⅰ组接种纳米铝佐剂禽流感H5N1灭活疫苗，Ⅱ组接种禽流感H5N1亚型油佐剂商品疫苗，Ⅲ组接种自制常规铝佐剂禽流感H5N1灭活疫苗，Ⅳ组注射灭菌生理盐水。分别于17、19、21、24、28、35、49日龄时每组抽取10只鸡，检测血清中抗体水平；分别于21、35、49日龄时每组抽取5只鸡，称重后心脏采血测定E玫瑰花环形成率、淋巴细胞增殖活性、血清溶菌酶含量及碳廓清指数，处死后眼观检查疫苗注射部位，分离取出胸腺、脾脏、法氏囊和注射部位的肌肉，进行常规石蜡切片。 实验结果： 1．纳米铝佐剂禽流感疫苗(H5N1)对肉鸡特异性免疫的影响研究。 纳米组能快速产生免疫应答反应，产生有效保护抗体时间较油佐剂疫苗和常规铝佐剂疫苗提前3天和7天，抗体峰值达到时间较油佐剂疫苗和常规铝佐剂疫苗提前14天，但抗体持续时间不如油苗持久；21日龄时，纳米组玫瑰花环形成率和淋巴细胞增殖力稍高于其他三组，但各组间比较无显著差异(P＞0.05)。 2．纳米铝佐剂禽流感疫苗(H5N1)对肉鸡非特异性免疫的影响研究。 21日龄时，纳米组溶菌酶含量和碳廓清指数均显著高于油苗组和对照组(P＜0.05)：但至35日龄和49日龄时，各组间差异不显著(P＞0.05)。 3．纳米铝佐剂禽流感疫苗(H5N1)对肉鸡免疫器官的影响研究。 21日龄时，纳米组的胸腺指数显著高于对照组，法氏囊指数明显高于其他二组(P＜0.05)；组织学观察发现，21日龄时纳米组的胸腺小叶及皮质面积、脾小结面积和法氏囊淋巴滤泡面积都高于其他三组。 4．纳米铝佐剂疫苗对肉鸡致反应性研究。 注射部位观察发现，油苗组35日龄时仍有未被吸收的乳白色油苗残余物；纳米组吸收良好，21日龄时只有少量淡黄色残余物：常规铝组的吸收情况略逊于纳米组。肌肉组织切片H．E染色比较发现，35日龄时，纳米组炎灶逐渐缩小，而油苗组和常规铝组仍表现很强炎性细胞浸润。49日龄时，纳米组炎性细胞已经被吸收殆尽，仅在毛细血管周围残存尚未被完全吸收的炎性细胞；常规铝组的炎性细胞也明显减少，而油苗组仍有大量炎性细胞未被吸收，炎灶明显。 以上结果表明纳米氢氧化铝作为高致病性禽流感H5N1的免疫佐剂，可以增强肉鸡的免疫力；与油乳剂相比，可以降低佐剂的副作用，改善生长期短的肉鸡胴体品质，为纳米氢氧化铝佐剂进一步推广应用提供基础。