黄曲霉毒素B<,1>(aflatoxin B<,1>，AFB<,1>)是由寄生曲霉(Aspergillus parasiticus)和产毒的黄曲霉(A.flavu)产生的一种真菌毒素，有很强的致癌性。许多粮油食品、饲料等都容易被AFB<,1>污染，从而危害人类健康和畜禽生产。所以，几乎所有国家和地区都规定了农产品、食品和饲料中AFB<,1>的最大允许含量，并作为强制性检测标准进行检测。 本研究首先以苯乙烯为单体，甲基丙烯酸为改性剂，采用无皂乳液聚合法制备了羧化聚苯乙烯微球(carboxylated polystyrene latex particles，CPLP)，然后以牛血清白蛋白(bovine serum albumin，BSA)免疫BALB/c小鼠，制备抗BSA抗体，研究了CPLP的致敏条件。在此基础上，以黄曲霉毒素B<,1>肟(aflatoxin B<,1> oxime，AFB<,1>O)与牛血清白蛋白(BSA)的连接物(AFB<,1>O-BSA)致敏CPLP，采用抗AFBl抗血清，建立了AFB<,1>的免疫胶乳快速检测技术。具体的研究内容如下。 1.CPLP的制备CPLP是在苯乙烯单体中添加甲基丙烯酸(methacylic acid，MAA)聚合而成的高分子微球。本研究以苯乙烯为单体，甲基丙烯酸作改性剂，采用无皂乳液聚合法，制备出了CPLP，并就改性剂的浓度、聚合时间和聚合温度对胶乳溶液的稳定性的影响、胶乳颗粒大小和苯乙烯单体的转化率进行了研究。结果表明，当改性剂为苯乙烯单体量的10％、75℃聚合12 h时，苯乙烯的转化率最大，达到92％，胶乳颗粒大小为240 nm。在此条件下制备的胶乳溶液，室温放置15 d没有出现沉淀。 2.胶乳致敏条件的优化以BSA为抗原免疫6～8周龄雌性BALB/c小鼠，制备抗BSA腹水抗体。以BSA致敏CPLP，用抗BSA抗体进行方阵滴定，观察凝集反应，研究了致敏条件对致敏效果的影响。结果表明，以0.05 mol/L，pH8.0的Na<,2>HPO<,4>-NaH<,2>PO<,4>缓冲液(PB)稀释CPLP乳液至1.0％，BSA的终浓度为0.5 mg/mL，37℃致敏30 min时，与1:160稀释的腹水抗体(效价1:40,000)发生凝集反应的效果最好。 3.AFB<,1>胶乳快速检测试剂的制备在上述研究基础上，制备了AFB<,1>胶乳快速检测试剂，并对试剂的最低检测限和稳定性进行了分析。结果表明，按上述条件制备的AFBl快速检测胶乳试剂，AFB<,1>最低检出限可达5 ng/mL。试剂经适当处理后，4℃放置3个月，质量稳定，而-20℃保存的试剂解冻后不能恢复成均匀乳液。该试剂具有微量、简便、快速和特异性强的特点，可用于AFB<,1>的定性和半定量现场快速检测。