【摘 要】
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本论文以Z.mobilis的基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增得到Z.mobilis的乙醇脱氢酶基因(adhⅡ)的强启动子区和终止子区.为了使来自绿色木霉的葡聚糖内切酶基因EgⅢ的cDNA能够
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本论文以Z.mobilis的基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增得到Z.mobilis的乙醇脱氢酶基因(adhⅡ)的强启动子区和终止子区.为了使来自绿色木霉的葡聚糖内切酶基因EgⅢ的cDNA能够在Z. mobilis的adhⅡ的强启动子控制下得到高效表达,利用重叠延伸剪接技术将EgⅢ的cDNA融合于该启动子和终止子之间,构建得到了针对Z. mobilis的整合型质粒pPEgTP,并利用电穿孔转化法将该重组质粒转入到Z. mobilis中.通过乙醛指示平板的显色反应并经PCR和测序鉴定筛选得到阳性重组菌株.论文的研究利用重叠延伸剪接技术成功地将来自绿色木霉的纤维素酶基因cDNA整合到了运动发酵单胞菌的基因组,在不需要选择压和诱导物存在的前提下得到了高效的表达,为对运动发酵单胞菌的遗传改造以扩大其可利用碳源范围提供了新的思路和方法.
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