目的乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,其发病率正在逐步上升。浸润性乳腺癌是主要导致女性癌症死亡的原因之一。30%-50%的乳腺癌患者中发现微钙化,微钙化乳腺癌恶性程度高,远处转移率高,预后较差。乳腺癌的微钙化组织中可见深电子密度的圆形颗粒,与骨折愈合细胞胞质内钙化的超微结构表现相似,因此,有人提出乳腺癌微钙化是一个主动、可调节的形成过程,在这个过程中有许多类型的物质加入了乳腺的钙化形成（包括一些蛋白质和一些细胞因子）。有研究者提出乳腺癌微钙化与RUNX2和OPN有关,生物学分析显示转录因子RUNX2可能与OPN启动子区域序列相结合,RUNX2基因可以抑制OPN启动子区域的活化,从而抑制乳腺微钙化的形成。虽然有以上众多的科学研究,但是对于RUNX2和OPN在乳腺癌中的钙化形成作用和其他方面的作用,以及RUNX2是如何对OPN起作用的研究仍然处于少数,并且这些研究都没有给出明确的定义。所以,本课题旨在分析乳腺癌钙化的临床特征和RUNX2及OPN在乳腺癌中的表达情况,以及RUNX2和OPN与乳腺癌临床病理资料和预后的关系,为乳腺癌的综合治疗寻找新的靶点。方法本研究随机选取2006年1月²008年12月收治的1035例乳腺癌患者,收集并整理患者的临床病理资料以及随访信息。应用统计学方法分析钙化与乳腺癌临床病理特征和预后的关系。随机选取上述资料中的经乳腺X线摄影检查的220例乳腺癌患者,其中有微钙化110例和无钙化110例。收集并整理患者的临床病理资料以及随访信息。应用免疫组化的方法检测RUNX2在和OPN在乳腺癌有微钙化组织和无微钙化组织中的表达情况,应用统计学方法分析RUNX2和OPN表达与各临床病理参数间的关系,结合患者生存情况分析其表达对患者预后的影响,并分析RUNX2与OPN的相关性。结果1.钙化与患者临床病理特征的关系钙化在乳腺癌中与有无淋巴结转移（χ²=4.120,P=0.042）、Her2的状态(χ²=24.03,P=1.05×10^-6)和不同的分子分型(χ²=30.54,P=1.06×10^-6)中差异具有统计学意义。钙化在乳腺癌中与肿瘤的大小（χ²=1.400,P=0.273）、不同的组织学分级（χ²=0.926,P=0.629）、ER的状态（χ²=0.236,P=0.627）和PR状态中没有明显的有统计学意义。2.无病生存的单因素及多因素分析单因素无病分析显示:肿瘤大小（χ²=7.232,P=0.007）、淋巴结转移χ²=31.471,P=2.024×10-8)、PR（χ²=8.820,P=0.003）、HER2（χ²=5.251,P=0.022）和分子分型（χ²=10.862,P=0.012）与患者的无病生存时间差异具有统计学意义。ER的状态（χ²=2.519,P=0.112）和钙化有无(χ²=0.440,P=0.507与患者的无病生存时间差异没有明显的统计学意义。多因素分析显示:淋巴结有无转移(P=3.233×10^-6)和PR的状态（P=0.025）与无病生存时间差异具有统计学意义。肿瘤大小（P=0.251）、有无钙化（P=0.743）、ER的状态（P=0.947）和HER2的状态（P=0.252）与患者的无病生存时间差异没有明显的统计学意义。3.总生存的单因素及多因素分析单因素总生存分析显示:肿瘤大小（（χ²=4.455,P=0.035）、淋巴结转移（χ²=32.696,P=1.077×10-8）、ER的状态（χ²=15.337,P=8.99×10-5）、PR的状态（χ²=15.337,P=8.99×10-5）、HER2（χ²=4.837,P=0.028）和不同的分子分型（χ²=12.494,P=0.006）与患者的总生存时间差异具有明显的统计学意义。钙化有无（χ²=0.440,P=0.417）与患者的总生存时间差异没有明显的统计学意义。多因素分析显示:淋巴结有无转移（χ²=0.440,P=0.417）和PR的状态（P=0.007）与总生存时间差异具有明显的统计学意义。肿瘤大小（P=0.493）、有无钙化（P=0.995）、ER的状态（P=0.596）和HER2的状态（P=0.687）与患者的总生存时间差异没有明显的统计学意义。4.RUNX2和OPN与乳腺癌患者临床病理特征的关系RUNX2在不同的病理分期（P=0.043）和有无钙化（P=1.42×10-12）中的表达差异具有统计学意义。而RUNX2在不同肿瘤大小（P=0.072）、不同的ER状态（P=0.081）、不同的PR的状态P=0.102）、不同的HER2状态（P=0.135）、不同分子分型（P=0.091）和不同的组织学分级（P=0.064）中的表达差异没有明显的统计学意义。OPN在不同的淋巴结状态（P=0.007）、不同的病理分期（P=0.004）、不同的HER2状态（P=0.049）、有无钙化(P=2.48×10^-6)和不同的分子分型中(P=2.48×10^-6)的表达差异具有统计学意义。而OPN在不同肿瘤大小P=0.100)、不同的ER状态（P=0.154）和不同的PR的状态（P=0.091）中的表达差异没有明显的统计学意义。5.RUNX2和OPN对患者的生存分析RUNX2的状态与患者的无病生存时间的单因素（P=0.020）和多因素分析（P=0.016）差异均有明显的统计学意义。RUNX2的状态与患者的总生存时间的单因素（P=0.008）和多因素分析（P=0.033）差异均有明显的统计学意义OPN的状态与患者的无病生存时间的单因素（P=0.161）和多因素分析（P=0.585）差异均没有明显的统计学意义。RUNX2的状态与患者的总生存时间的单因素（P=0.054）和多因素分析（P=0.757）差异均没有明显的统计学意义。6.RUNX2和OPN在乳腺癌中的表达情况及相关性分析免疫组化显示:RUNX2与OPN在乳腺癌组织中研究结果差异具有显著的统计学意义(r=0.417,P=0.417×10^-10)。Runx2与OPN在乳腺癌中呈正相关。结论1、在淋巴结阳性、HER2阳性和HER2型的乳腺癌中钙化的比例高,提示钙化与乳腺癌的进展相关。2、RUNX2与OPN在乳腺癌组织中的表达呈正相关,RUNX2在III-Ⅳ期和钙化型乳腺癌中呈高表达。OPN在淋巴结阳性、III-Ⅳ期、有钙化、HER2阳性和HER2型乳腺癌中呈高表达。提示Runx2和OPN可能与钙化的形成有关并且乳腺癌的不良预后有关。3、肿瘤>2cm、淋巴结阳性、RUNX2高表达、HER2阳性和HER2型的乳腺癌患者预后差。