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杏仁核是位于哺乳动物端脑的杏仁核复合体,根据解剖学和功能学的不同,分为中央杏仁核(central amygdala,CeA),外侧杏仁核(lateral amygdala,LA)和杏仁核基底核(basal amygdala,BA)。中央杏仁核含有葡萄糖敏感神经元,参与摄食和体重调节。促胰液素(secretin)是由27个氨基酸组成的肽,属于促胰液素/胰高血糖素肽类超家族。中央杏仁核高表达促胰液素和促胰液素受体。研究发现小鼠腹腔和脑室给予促胰液素均可抑制摄食。 目的:探讨大鼠中央杏仁核促胰液素的电生理效应及其对摄食行为的调控。 方法:本实验采用多管微电极在体细胞外电生理记录技术和摄食行为学实验方法。 结果:1.在记录到的27个大鼠中央杏仁核神经元中,微压力注射0.1μM促胰液素可使13个神经元(48.15%)自发放电频率明显增加,放电频率由2.30±0.91Hz增加至3.20±1.07Hz(P<0.001)。放电频率平均增加104.22±26.18%,与生理盐水对照组相比有统计学意义(P<0.01)。此外,促胰液素使6个神经元(22.22%)自发放电频率明显降低,放电频率由6.03±2.13Hz降低至2.20±1.39Hz(P<0.05),平均降低68.80±12.10%,与生理盐水对照组相比有统计学意义(P<0.001)。大鼠中央杏仁核微压力注射高浓度(0.1mM)促胰液素,可使所记录到的15个神经元自发放电频率平均升高228.42±48.40%,兴奋效应明显强于0.1μM促胰液素(P<0.05)。 2.中央杏仁核神经元有两种放电模式:簇状放电和不规则放电。为了观察促胰液素是否影响大鼠中央杏仁核神经元放电模式,我们分析了给药前后神经元自发放电间隔(inter-spike interval,ISI)的变异系数(coefficient of variation,CV)和法诺因子(fano factor,FF)值。在促胰液素产生兴奋效应的中央杏仁核神经元,加药前CV值与加药后CV相比没有明显变化,差别无统计学意义(加药前:1.19±0.16;加药后:1.17±0.16;P>0.05),同时观察到FF值也没有明显改变(加药前:2.74±0.80;加药后:1.79±0.52;P>0.05)。同样,在促胰液素产生抑制效应的中央杏仁核神经元,加药前CV值与加药后CV相比没有明显变化,差别无统计学意义(加药前:1.03±0.08;加药后:1.29±0.12;P>0.05),同时观察到FF值也没有明显改变(加药前:0.64±0.43;加药后:2.60±1.53;P>0.05)。 3.在记录到的117个中央杏仁核神经元中,微压力注射0.5M葡萄糖使16个神经元(13.68%)放电频率明显降低,为葡萄糖敏感神经元。在这16个葡萄糖敏感神经元中,促胰液素可使其中7个神经元(基础放电:4.15±1.28Hz,葡萄糖:2.15±0.79Hz,P<0.05,n=7)自发放电频率明显降低,放电频率由5.31±1.48Hz降低至1.74±1.01Hz(P<0.01),平均降低75.32±10.47%,与生理盐水对照组相比有统计学意义(P<0.001)。 4.在清醒动物摄食测试实验中,双侧中央杏仁核微量注射0.1μM促胰液素(0.5μl/侧)显著降低大鼠摄食量,在观察的第1h,2h,4h和12h的摄食量明显低于生理盐水对照组,分别降低46.08±8.54%(P<0.001),44.41±8.87%(P<0.01),54.00±6.76%(P<0.001)和35.66±9.49%(P<0.01)。在另一组实验,分别观察了大鼠双侧中央杏仁核微量注射10μM H89(cAMP激活的蛋白激酶抑制剂)以及H89和促胰液素混合物对摄食量的影响。结果显示与单独给予H89相比,中央杏仁核注射H89和促胰液素混合物对大鼠摄食量没有明显影响(1h,2h,4h和12h,P>0.05,n=11),提示促胰液素可能是通过cAMP-PKA途径抑制摄食。 结论:电生理学实验显示促胰液素可以直接兴奋大部分中央杏仁核神经元,而抑制中央杏仁核内葡萄糖敏感神经元。促胰液素可能通过调节中央杏仁核神经元兴奋性而参与摄食调控。中央杏仁核促胰液素可能通过cAMP激活的蛋白激酶发挥其对摄食行为的调控作用。本实验结果为进一步探讨中枢促胰液素的生物学效应提供了有力的理论和实验依据。