花椰菜(Brassica oleracea var. botryis)是我国常见的蔬菜之一，然而虫害的发生造成花椰菜品质下降和大幅度减产，已成为制约花椰菜生产的重要因素之一。利用基因工程技术培育抗虫农作物品种，已成为当今植物虫害防治的重要手段。一些重要抗虫基因已经成功分离并应用于基因工程，为培育植物抗虫品种开辟了一条安全有效的新途径，具有重要的应用价值和巨大的市场潜力。　　 本研究将杨树来源的抗虫基因Kunitz型丝氨酸胰蛋白酶抑制剂(KTI)基因连入具有人工合成的G10-90启动子的无抗生素抗性筛选标记的表达载体pX6中，构建了双元表达载体pX6-KTI，具有在植物中表达的新霉素磷酸转移酶基因NPTⅡ以及cre基因，可在甾二醇诱导下去除NPTⅡ抗性标记，实现marker free。以花椰菜云山品种为供试材料，在原有报道的基础上，建立和优化了花椰菜再生、遗传转化体系，通过根癌农杆菌介导法将目的基因KTI成功转入受试品种，以获得高抗虫性的转基因植株。获得子叶柄分化培养基MS+6-BA1mg/L+NAA0.025mg/L+Agar0.7％，下胚轴分化培养基MS+6-BA1mg/L+NAA0.1 mg/L+Agar0.7%，生根培养基1/2 MS+Agar0.5%；最优的转化条件为预培养2d，菌液稀释后浓度为OD600值0.2-0.3，浸染30s，共培养2d。在脱菌和筛选阶段添加Cef200 mg/L，分化阶段的Kan筛选浓度为25 mg/L，生根阶段的筛选浓度为15mg/L。通过Kan初步筛选得到23株抗性苗，其中有10株移栽成活。4株经PCR检测呈阳性，2株经Southern blotting检测证实KTI基因成功整合到受体基因组中；其中1株经RT-PCR检测证实目的基因已成功表达。