目的：探讨用BMSCs诱导分化的内皮细胞为种子细胞，以胶原-壳聚糖复合物为支架材料，运用组织工程学的原理和方法体外构建组织工程心脏瓣膜的可行性。 方法：无菌条件下获得兔骨髓液，贴壁培养法分离BMSCs，DMEM培养液体外培养、扩增、诱导分化为内皮细胞，并行内皮细胞鉴定；组织块培养法体外分离、培养、扩增兔主动脉壁成纤维细胞、平滑肌细胞，并行成纤维、平滑肌细胞鉴定；将成纤维、平滑肌细胞与内皮细胞按顺序种植在预湿处理的胶原-壳聚糖复合支架上，体外培养观察，同时将支架材料移植入新西兰大白兔背阔肌表面，定期取出检查。通过组织学及倒置显微镜、扫描电镜观察内皮细胞在体内支架上粘附、增殖、生长和基质分泌情况及材料的组织相溶性和体内降解情况。 结果：1．胶原-壳聚糖复合材料具有良好的亲水性和细胞亲和力，皮内埋置实验显示生物相容性好，体内降解时间为8～10周；2．骨髓细胞基质干细胞（BMSCs）贴壁生长，在生长因子等诱导下可分化为内皮细胞，细胞生长曲线良好。组织块培养法体外成功分离、培养、扩增兔主动脉壁成纤维细胞、平滑肌细胞；3．以成纤维、平滑肌细胞和内皮细胞为种子细胞，以胶原-壳聚糖复合材料为支架，体外可以构建TEHV：HE示内皮细胞能够在胶原-壳聚糖复合支架上粘附、伸展、增殖并分泌基质，在TEHV表面长成一连续细胞层；SEM示TEHV表面光滑，细胞生长良好，细胞层完整。且瓣膜表面的内皮细胞具有合成和分泌前列环素（PGI₂）的功能。 结论：以主动脉壁体外分离、培养、传代的平滑肌、成纤维细胞和BMSCs诱导分化的内皮细胞为种子细胞，依次种植在胶原-壳聚糖复合支架上可以构建TEHV，且内皮细胞能够分泌PGI₂。