论文部分内容阅读
目的：贲门癌在国内属常见病，严重威胁着人民的健康，在河南、河北的食管癌高发区，贲门癌的发病率呈上升趋势。目前，贲门癌的治疗首选手术，化学治疗为主要辅助手段。传统静脉化疗往往不能在肿瘤局部达到有效浓度，治疗效果较差，且药物不良反应较多。近年来，腹腔化疗作为一种区域性化疗方式正受到广泛关注，同静脉化疗相比，腹腔化疗具有明显的药代动力学优势，局部的药物浓度比静脉用药高10～1000倍，大大提高了药物疗效。同时，腹腔化疗的高选择性又可减少化疗药物的全身毒副反应,提高患者的生存质量。为此，本试验应用紫杉醇脂质体（力扑素）对贲门癌患者行术前腹腔灌注化疗，使用液质联用法检测贲门癌、癌周组织、大网膜及胃左淋巴结中的药物浓度，并采用流式细胞术检测癌、癌周组织的细胞凋亡率和细胞周期的变化，研究药物的分布规律和作用机制，评价药物不良反应及对机体肝肾功能的影响，探讨术前应用紫杉醇脂质体腹腔灌注治疗进展期贲门癌的价值和安全性。方法：先后选取27例进展期贲门癌患者进行术前单次腹腔灌注化疗，其中前16例患者接受低剂量化疗（紫杉醇脂质体60mg溶入1000ml5%葡萄糖注射液，药品浓度=60μg/ml），为低剂量组。对后11例患者进行较高剂量（紫杉醇脂质体90mg溶入1000ml5%葡萄糖注射液，药品浓度=90μg/ml）化疗，为高剂量组。全组化疗3天后行贲门癌切除术，术中取贲门癌病灶、正常胃黏膜、大网膜及胃左淋巴结，采用液质联用法（HPLC-MS）测定以上各组织中的药物浓度；术中观察病灶特征，术后在光镜下观察贲门癌组织病理学变化；高剂量组患者化疗前经胃镜钳取癌灶、癌周组织各一份，用流式细胞仪（FCM）分析细胞凋亡指数及细胞周期时相，并根据自身对照原则，与术后切取的相应标本进行比较；分别于化疗前、后（手术前1天、术后第7天）检查血常规、肝肾功能，对差值进行统计学分析。结果：127例患者全部完成术前腹腔化疗，低剂量组未出现明显不良反应，高剂量组有2例用药后出现轻微腹痛，休息后症状自行缓解。两组均未出现化学性腹膜炎及严重消化道毒性症状，化疗后全部患者接受贲门癌切除手术，其中24例（85.7%）获得根治性切除。2腹腔化疗后，低剂量组和高剂量组术中切取各组织中紫杉醇脂质体的药物浓度平均值分别为癌灶（283.36±46.48）ng/g、（484.59±73.31） ng/g，癌周正常胃黏膜（130.58±27.07） ng/g、（171.45±25.75） ng/g，大网膜（453.99±72.24） ng/g、（662.04±53.45） ng/g，胃左淋巴结（190.33±40.55） ng/g、（271.42±34.77） ng/g。两组组内两两比较药物浓度差异显著（P<0.05），浓度大小依次为大网膜>癌组织>胃左淋巴结>正常胃黏膜；各组织药物浓度组间比较差异显著（P<0.05），均为高剂量组>低剂量组。3使用紫杉醇脂质体进行腹腔内灌注化疗后，低剂量组用药前后（化疗前、术前1天、术后7天之间进行比较）WBC计数平均值分别为（6.92±1.19）×109/L、（10.66±2.30）×109/L、（6.82±1.62）×109/L，其中术前1天WBC计数明显高于化疗前（P=0.000），而化疗前与术后7天之间比较无显著差异（P=0.786）；高剂量组WBC计数平均值分别为（5.81±1.31）×109/L、（9.35±3.44）×109/L、（6.37±2.35）×109/L，其差异规律同低剂量组。化疗前后外周血RBC、PLT计数及血清ALT、AST、BUN、Scr值均无明显差异（P>0.05）。4腹腔化疗前癌组织、癌周组织的平均细胞凋亡指数分别为：（4.37±0.93）%、（4.33±1.01）%，化疗后则分别为（7.56±1.87）%和（4.72±1.08）%。化疗后高剂量组中癌组织的平均细胞凋亡指数显著高于化疗前癌组织和化疗后癌周组织（P=0.000）。癌组织中药物浓度与细胞凋亡指数呈正相关（r=0.960，P=O.O00）。用药前后癌周组织的细胞凋亡率无明显变化（P=0.390）。5紫杉醇脂质体腹腔灌注后，癌组织中G0/G1期、S期细胞比例较前均无明显变化（P>0.05）， G2/M期细胞则从化疗前的（6.96±1.68）%上升到（9.34±2.73）%（P=0.005）。而用药前后癌周组织的各细胞周期变化均不明显（P>0.05）。6术前化疗后，个别病例术中可见瘤组织表面片状炎性改变，光镜下局部可见不同程度的癌细胞变性、坏死,凋亡小体形成。变性坏死灶周围可见间质纤维组织增生，细胞间质中可见大量淋巴细胞、浆细胞和巨噬细胞等炎细胞浸润。与低剂量组比较，高剂量组的细胞形态学变化更加明显。结论：1紫杉醇脂质体腹腔灌注后，各组织中药物浓度大小给随药物剂量的增大而提高。药物在腹腔内分布规律为：大网膜>癌灶>胃左淋巴结>正常胃黏膜。说明该药抗癌靶向性强，网膜吸收度高，而对正常胃组织损伤小，腹腔灌注的给药途径或可增加紫杉醇脂质体的作用强度。2紫杉醇脂质体腹腔灌注后，患者耐受良好，未出现明显骨髓抑制效应。尿素氮和肌酐值较化疗前无明显变化，说明应用此药进行腹腔灌注是安全可行的。3紫杉醇脂质体腹腔应用后能显著促进癌细胞凋亡、变性和坏死，随着癌组织中药物浓度增加，这种形态学变化也越明显。药物可将癌细胞阻滞于G2/M期，抑制肿瘤细胞的分裂增殖，延缓肿瘤生长，证实了紫杉醇脂质体对贲门癌的确切疗效。4此项研究结果并未显示细胞周期阻断与细胞凋亡的关系，提示紫杉醇诱导癌细胞凋亡的方式多样，尚需进一步研究证实。