苯并苝、晕苯探针自组装在生物分析中的应用

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拥有大的平面结构和延伸的兀共轭体系的多环芳香染料具有很好的紫外-可见光谱吸收、优异的稳定性、独特的电子及自组装性质,广泛应用于化学和材料科学领域。苯并苝及晕苯衍生物的单体荧光量子产率高,由于分子间π-π相互作用而具有很强的自组装性质,自组装形成大的超分子结构具有极好的光电性能。但这类探针在水中溶解性差,且容易自集聚导致荧光淬灭,因此很少用于生物分析中。本工作中,详细研究了苯并苝及晕苯衍生物探针在水溶液中的荧光和自组装性质,结合苯并苝探针的“单体—缔合物”荧光性质、晕苯探针在水溶液中自组装性质以及晕苯探针与聚多巴胺材料的相互作用,开发了几种生物传感新方法,拓展了该类探针在生物分析领域的应用。主要内容如下:  1.基于聚合物诱导苯并苝探针可控自组装以及探针的“单体—缔合物”荧光性质,构建了一种比率荧光检测肝素及肝素酶的新方法。选择了一种带负电荷的苯并苝衍生物探针BPDI,BPDI在水溶液发射强的单体荧光,阳离子聚合物可以诱导探针集聚,单体荧光淬灭,同时发射明显的缔合物荧光。加入肝素时,肝素与聚阳离子结合,探针单体荧光恢复。当加入肝素酶时,肝素被水解,可以检测到探针单体荧光向缔合物荧光信号的转变。基于此原理可进行比率荧光检测肝素及肝素酶。  2.基于晕苯衍生物自组装材料的过氧化物酶性质,建立了一种比色传感过氧化氢和葡萄糖的新方法。合成了一种水溶性的晕苯二酰亚胺探针CTDI,CTDI在水溶液中自组装形成一维纳米纤维结构,该材料具有过氧化物酶的性质,可以催化3,3,5,5-四甲基联苯胺(TMB)与H2O2的显色反应,使溶液由无色转变为蓝色。随着H2O2浓度的增加,TMB溶液的紫外-可见光谱吸收增强。在氧气存在的条件下,葡萄糖氧化酶能催化葡萄糖氧化从而产生H2O2,进而可以氧化TMB使其显色,溶液颜色变化与加入的葡萄糖的浓度相关。将本文的方法用于血液中葡萄糖浓度分析,获得的结果与市售血糖仪测的结果一致,证明该方法具有潜在的实际应用价值。  3.基于多巴胺的可控聚合及聚多巴胺与晕苯探针的相互作用,设计了一种荧光Turn-on检测乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的新方法。合成了一种水溶性的晕苯衍生物荧光探针CTCA。多巴胺可以在空气中自发氧化聚合形成聚多巴胺。聚多巴胺可以有效地淬灭探针CTCA的荧光。加入AChE时,底物硫代乙酰胆碱被水解产生巯基胆碱,具有还原性质的巯基胆碱可抑制多巴胺的聚合,导致探针荧光恢复。当有AChE抑制剂存在时,抑制剂会抑制AChE的活性,导致多巴胺聚合,探针的荧光淬灭。基于此原理构建了一种AChE活性分析新方法,并将其用于人血清中AChE活性分析和实际水样中AChE抑制剂的检测。这种可控合成淬灭剂的方法简单,灵敏,选择性好,为构建高灵敏荧光生物传感器提供了一种新思路。
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