论文部分内容阅读
目的通过检测淋巴瘤及骨髓异常增生综合征(MDS)病人骨髓细胞中EB病毒(EBV)DNA(EBV-DNA)的拷贝数,以探讨EBV感染与淋巴瘤及MDS的发生、发展及染色体改变的相关性,同时探讨EBV感染在淋巴瘤的免疫分型及淋巴瘤与MDS病人预后判断中的价值。方法采集198例淋巴瘤及MDS病人的骨髓标本作为实验病例组,其中包括霍奇金淋巴瘤(HL)病人14例,非霍奇金淋巴瘤(NHL)病人136例,骨髓异常增生综合征(MDS)病人48例,同时采集37例健康者(骨髓象正常且无任何血液系统疾病)的骨髓作为对照组。运用苯酚-氯仿-异戊醇法提取骨髓液中单个核细胞中的DNA,采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测所提取的全部样本骨髓液细胞中的EBV-DNA;采取骨髓细胞短期培养法制备染色体标本,用R显带技术分析染色体核型;采用流式细胞技术对NHL病人进行免疫表型分析,探讨T-NHL和B-NHL与EBV感染的相关性。并对部分病人进行了临床随访,以进一步探讨EBV感染与淋巴瘤、MDS病人的复发及死亡的影响。结果198例淋巴瘤及MDS病人中有76例检测到EBV-DNA,总体阳性率38.4%,而对照组仅中有2例(5.4%)检测到EBV-DNA,病例组中EBV-DNA的阳性率明显高于对照组(χ2=13.8,p<0.01)。HL、NHL和MDS病人EBV-DNA的阳性率分别为64.3%(9/14)、36.8%(50/136)和35.4%(17/48),均显著高于对照组(χ2=17.4,12.1,10.7,p<0.01),其中HL组EBV-DNA的阳性率高于NHL(χ2=4.03,p<0.05),但HL与MDS,NHL与MDS间EBV-DNA的阳性率无差异(χ2=3.71,0.03,p>0.05)。结合流式细胞仪的分型结果,110例B-NHL中40例检测到EBV-DNA,阳性率为36.4%(40/110);26例T-NHL中10检测到EBV-DNA,其阳性率为38.5%(10/26),B-NHL与T-NHL病人间EBV-DNA的阳性率没有差异(χ2=0.04,p>0.05)。染色体R显带核型分析显示,20例EBV-DNA阳性患者(NHL、MDS各10例)检测到染色体核型异常,染色体异常的检出率为26.3%(20/76),而在EBV-DNA阴性的患者中有27例(NHL 12例、MDS 15例)检测到染色体核型的异常,染色体异常的检出率为22.1%(27/122),EBV感染与染色体异常无显著相关性(χ2=0.45,p>0.05)。临床随访显示,2年内EBV阳性病人和EBV阴性病人的复发率和死亡率分别为56.1%(23/41)、31.7%(20/63)和24.4%(10/41)、3.2%(2/63)(p<0.05)。与EBV阴性病人相比,EBV阳性病人具有更高的复发率和死亡率。在进展为急性白血病的11例MDS中有8例(72.7%)为EBV阳性,有3例(27.3%)为EBV阴性,MDS中EBV阳性病人的转白率明显高于EBV阴性病人(χ2=6.70,p<0.05),表明MDS转白与EBV感染之间存在一定的相关性。结论EBV感染与淋巴瘤、MDS的发生及病情进展有关,但与染色体改变及HL的免疫分型没有相关性;EBV感染与淋巴瘤、MDS病人的预后有关,EBV-DNA阳性病人有较高的复发率和死亡率,预后不佳。