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在我国的农业生产中,作物的蚜虫防治工作仍主要采用的是化学杀虫剂对其进行灭杀,但是这个方法开销太大而且效率也不高,并且带来了日趋严重的有关人类健康和环境的污染问题,所以目前大部分的研究者们更加关注有关农作物抗虫育种方面的研究应用。
转基因育种具有普通的常规育种不具备的优势:①拓宽了可应用的基因资源:②培育出了优质、高产、高抗等一些优良品种;③可以对植物的目标性状实行定向变异或定向选择;④这就大大提高了选择的效率,加快了育种的进程。掌叶半夏凝集素(PPA)是从掌叶半夏中分离出来的具有凝血活性的掌叶半夏蛋白,同时也具有与甘露糖及其聚合物专一结合的特性,有凝血、抗肿瘤、杀虫等重要生理功能,近年来已成为研究热点。
本课题从天南星科半夏属的掌叶半夏中克隆得到了一种新型的植物凝集素(PPA)基因,通过农杆菌转化的办法将其导入到拟南芥这种模式植物中,通过几代的筛选得到纯合体,再通过放虫试验,就可以验证该基因的抗虫功能。
本文首先运用基因工程技术对PPA基因进行克隆,实验通过改造pCAMBIA1380质粒,使得PPA基因在表达载体中与在双子叶植物中有较强表达活性的启动子的35s以及近年来新发现的荧光蛋白GFP相结合,得到以下成果:①构建成功真核表达载体得到35s启动子驱动基因的植物表达载体pCAMBIA1380-35s-PPA-GFP;②通过农杆菌转化的技术成功将其转入到拟南芥中;③得到了纯合体的植株,为后续的抗虫实验提供了实验平台和基础材料。