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地鳖又名土元、土鳖,药用始见于《神农本草经》,在我国药用已有两干余年历史,祖国医学记载和丰富的临床实践均已证明其具有破血逐瘀、续筋接骨、消炎散结、舒经活血和疗伤止痛等重要药用功效。现代药学研究表明,地鳖及其提取物具有显著活血化瘀与抑瘤功效。随着现代中医药的发展,地鳖虫的药理研究越来越深入,在食品、医疗、保健等方面有广阔的应用前景。
本文以传统中药材中华真地鳖为原料,采用匀浆、盐析、硫酸铵分段沉淀、透析和DEAE-52纤维素离子层析等纯化方法,从其体内分离纯化得到一种纤溶活性蛋白(Fibrinolyric Protein of Eupolyphaga sinensis Walker,EFP),采用SDS-PAGE电泳法对其进行了分子量和纯度测定,采用纤维蛋白平板法测定EFP纤溶活性,并研究温度、时间、表面活性剂、天然抑制剂、紫外线、超声波和金属离子等因素对其纤溶活性的影响。EFP被制成针剂注射到荷有S180和H22实体瘤的小鼠当中,处死小鼠后取实体瘤,计算抑瘤率,流式细胞仪测定细胞凋亡率,并测定caspase-3的表达。用大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌注射诱导中华真地鳖,取其血淋巴进行抗菌活性实验,以寻求最有效的诱导菌和诱导时间,并通过加样量、pH、温度和加热时间等影响因素得到其对血淋巴抗菌活性的影响。结果表明,从地鳖中提取纯化的EFP为相对分子量为87.2kD的单一成分,具有显著的纤溶活性,且其受各种物理、化学因素影响。地鳖纤溶活性蛋白对S180和H22实体瘤有一定的抑瘤作用,并引起其细胞凋亡及caspase-3表达提高。经过诱导的地鳖血淋巴有一定的抗菌活性,并随着加样量的增大诱导血淋巴的抑菌效果增强;抑菌活性的最适pH值为5.0;血淋巴的抗菌活性热敏性较强,80℃和100℃加热短时间内失活。