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第一部分实验研究目的：通过高脂饮食联合反复LPS肌肉注射建立AS模型,观察斑块内巨噬细胞凋亡及相关信号通路中主要信号分子的变化,并观察清热解毒中药黄芩的主要有效成分黄芩苷对斑块内巨噬细胞凋亡及相关信号通路的影响,为清热解毒法用于AS及其相关疾病的防治提供理论依据。方法：48只新西兰白兔适应性喂养7天后,随机分为六组：正常对照组、高脂对照组、高脂+内毒素(LPS)模型组、黄芩苷低剂量组、黄芩苷高剂量组和辛伐他汀组。正常对照组喂食普通饲料,其余各组喂食高脂饲料,共16周。高脂+LPS模型组、黄芩苷低剂量组、黄芩苷高剂量组和辛伐他汀组在第4、8、12周,于右侧耳动脉,颈动脉和股浅动脉旁肌肉注射LPS。黄芩苷低剂量组和高剂量组,在第一次注射LPS后,分别以黄芩苷50mg/kg/d和100mg/kg/d灌胃(5m1蒸馏水溶解),辛伐他汀组,在第一次注射LPS后,以lmg/kg/d的辛伐他汀灌胃(5m1蒸馏水溶解)；空白对照组、高脂对照组和高脂+LPS模型组以5m1蒸馏水灌胃,各组灌胃每日1次,连续12周。第16周末处死全部动物,采用生化分析法检测血脂水平(TC、TG、LDL-C、HDL-C),采用鲎试剂法检测血清LPS水平,采用ELISA法检测血清CRP、IL-1水平,采用HE染色观察主动脉组织形态,采用TUNEL法检测主动脉斑块细胞凋亡,采用免疫组化法检测主动脉斑块CD14、CHOP、JNK蛋白表达,采用荧光定量RT-PCR法检测主动脉p38MAPK、JNK、 SR-A、Bcl-2、Bax和Caspase3的mRNA表达。结果：实验结束时,高脂饲料喂养各组兔血清TC和LDL-C水平均明显升高(P<0.05),与高脂对照组比较,高脂+LPS模型组的TC和LDL-C水平有升高趋势,但差异未达统计学意义(P=0.185和P=0.176)；与高脂+LPS模型组比较,各治疗组(黄芩苷低、高剂量组,辛伐他汀组)TC和LDL-C水平均明显降低(P<0.01),黄芩苷高剂量组较低剂量组和辛伐他汀组TC和LDL-C水平明显降低(P<0.01)。血清LPS水平比较：与高脂+LPS模型组比较,空白对照组和高脂对照组LPS水平明显要低(P<0.01),提示反复肌肉注射LPS可以使兔血清LPS水平升高；与高脂+LPS模型组比较,黄芩苷低剂量组(P<0.05)和高剂量组LPS(P<0.01)水平亦明显要低,提示黄芩苷可能具有降低血清LPS水平的作用,且黄芩苷高剂量组比低剂量LPS水平明显要低(P<0.01),提示这种作用可能具有浓度依赖性。血清炎症因子CRP和IL-1比较：与空白对照组比较,高脂对照组和高脂+LPS模型组CRP和IL-1水平均明显升高(P<0.01),且高脂+LPS模型组较高脂对照组CRP水平明显更高(P<0.05),提示高脂饮食可导致体内炎症因子水平升高,而反复LPS肌肉注射可加重这种炎症反应；与高脂+LPS模型组比较,三个药物干预组CRP水平均有明显下降(P<0.01),黄芩苷高剂量组(P<0.01)和辛伐他汀组(P<0.05)IL-1水平均有明显下降,提示黄芩苷和辛伐他汀都能减轻高脂饮食联合LPS肌肉注射导致的炎症反应。HE染色提示,正常对照组主动脉组织结构正常,高脂饮食各组兔的主动脉内膜均出现斑块,高脂对照组内膜不光滑,局部增厚,内皮细胞大量脱落,内皮连接疏松不连续,斑块内较多泡沫细胞沉积,斑块表面形成溃疡,泡沫细胞核大小不一,内膜、中膜分离；高脂+LPS模型组除上述变化外,斑块内泡沫细胞沉积数量更多,泡沫细胞核碎裂,核碎片大小不一；黄芩苷高、低剂量组斑块表面内皮细胞较多,内皮相对完整、连续,泡沫细胞核大小一致；高剂量组和辛伐他汀组斑块内沉积泡沫细胞均较少。TUNEL染色提示：TUNEL阳性细胞主要集中在内膜斑块内,中膜平滑肌层较少。高脂饮食可促进AS斑块内细胞凋亡(P<0.01),且联合LPS反复局部肌注,可进一步促进AS斑块内细胞凋亡(P<0.01),而黄芩苷和辛伐他汀可抑制斑块内细胞凋亡(P<0.01)。免疫组化检测提示,CD14、CHOP和JNK蛋白主要在主动脉斑块内巨噬细胞表达,而中膜平滑肌细胞表达极少。与对照组比较,高脂对照组和高脂+LPS模型组CD14表达总分明显升高(P<0.01),且高脂+LPS模型组较高脂对照组CD14表达总分明显升高更明显(P<0.05),提示高脂饮食可导致斑块内细胞CD14表达增强,且反复LPS局部注射可增强该作用。与对照组比较,高脂对照组和高脂+LPS模型组CHOP表达总分明显升高(P<0.01),高脂对照组和高脂+LPS模型组之间无明显差异,提示高脂饮食可导致斑块内细胞CHOP表达增强；与高脂+LPS模型组比较,黄芩苷高剂量组CHOP.总分明显降低(P<0.05),提示高剂量黄芩苷可以抑制斑块内细胞CHOP表达。与对照组比较,高脂对照组和高脂+LPS模型组JNK表达总分明显升高(P<0.01),高脂对照组和高脂+LPS模型组之间无明显差异,提示高脂饮食可导致斑块内细胞JNK表达增强。荧光定量RT-PCR检测提示,和空白对照组比较,各组高脂喂养兔主动脉Caspase-3、p38MAPK、JNK、SR-A和Bax mRNA表达明显增强(P<0.01),Bcl-2mRNA表达明显减弱(P<0.05),且反复LPS肌肉注射可进一步增强p38MAPK. JNK mRNA表达(P<0.01),而黄芩苷可以抑制Caspase-3.p38MAPK.JNK.SR-A和BaxmRNA表达和增强Bcl-2mRNA表达(P<0.05或P<0.01),辛伐他汀可以抑制Caspase-3、 p38MAPK、JNK和Bax mRNA表达(P<0.01)。结论：高脂饮食可以导致兔高脂血症,从而促进AS斑块进程,反复LPS肌肉注射可能加重AS斑块形成和不稳定性,而黄芩苷和辛伐他汀可能减轻AS斑块形成和不稳定性。高脂饮食可以增加主动脉斑块巨噬细胞凋亡,而黄芩苷和辛伐他汀都可减少斑块内巨噬细胞凋亡。高脂饮食可能通过内质网应激,激活未折叠蛋白反应,从而激活JNK—Bcl-2/BaX—Caspase-3通路和p38-CHOP—Bcl-2/Bax—Caspase-3通路,增强SR-A表达,共同诱导斑块巨噬细胞凋亡。黄芩苷可能通过减轻内质网应激,抑制JNK—Bcl-2/Bax—Caspase-3通路和p38—CHOP—Bcl-2/Bax—Caspase-3通路,抑制SR-A表达,从而减少斑块巨噬细胞凋亡。辛伐他汀可能通过抑制JNK—Bax—Caspase-3通路和p38—Bax—Caspase-3通路,从而减少斑块巨噬细胞凋亡第二部分临床研究目的：探讨在西医常规治疗和中医活血法基础上,联合清热解毒法对冠心病急性冠脉综合征(ACS)患者的临床疗效及安全性的影响。方法：采用随机对照研究方法,将纳入的符合热毒血瘀辨证标准的94例ACS住院患者随机分为三组：西药组、活血组和清热解毒活血组。西药组采用西医常规治疗,活血组采用西医常规治疗联合冠心Ⅱ号方治疗,清热解毒活血组采用西医常规治疗联合清热活血方治疗,疗程1周。观察治疗前后中医证侯评分、中医证侯疗效、血清脂蛋白相关磷脂酶A2水平及安全性指标变化。结果：治疗前各组ACS急性期患者热象比较明显,治疗前烦热、口苦、小便短黄、大便干结、舌苔黄等积分较高。治疗后,在胸痛、胸闷症候上,与西药组比较,活血组和清热解毒活血组症候改善更明显(P<0.01),且清热解毒活血组较活血组症候改善更明显(P<0.05)；在心悸、气短、疲乏、畏寒等症候上,活血组和清热解毒活血组疗效也比西药组好(P<0.01),而活血组和清热解毒活血组之间比较无明显差别；在烦热、口干、口苦、小便短黄、大便干结、舌苔黄厚腻干等火热症候方面,清热解毒活血组较西药组、活血组有明显改善(P<0.01和P<0.05),而西药组和活血组之间无明显差异。治疗后,清热解毒活血组中医症候总积分较西药组、活血组有明显改善(P<0.01)；清热解毒活血组中医总体症候疗效较西药组明显改善(P<0.05)。血清脂蛋白相关磷脂酶A2水平方面,清热解毒活血组较西药组、活血组下降更明显(P<0.01和P<0.05)。各组均无明显不良反应。结论：冠心病ACS急性期患者热毒症候比较明显；在西药、活血中药的基础上,联用清热解毒中药,能进一步改善冠心病ACS急性期患者中医症候,尤其能明显改善烦热、口干、口苦、小便短黄、大便干结、舌苔黄厚腻干等中医“热毒”症状,且不会加重气短、疲乏、畏寒等气虚、阳虚症状；在西药、活血中药的基础上,联用清热解毒中药,能进一步降低患者血清脂蛋白相关磷脂酶A2水平,提示清热解毒中药可能具有改善斑块巨噬细胞凋亡、改善冠心病ACS预后的作用。因此,在西医常规治疗和中医活血法基础上,联合清热解毒法对冠心病ACS患者的临床运用安全、有效。