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MicroRNAs(miRNAs)是一类22～25核苷酸长度的内源性非编码小RNA,它可通过与靶mRNA3’非编码区(3’untranslatedregion,3’UTR)互补配对,降解或抑制靶mRNA,对调控基因表达进行转录后调控。miRNAs通过转录后调节基因表达,参与细胞间信号传递、细胞增殖、生长、分化、凋亡以及细胞代谢等多种生物过程。研究发现,miRNAs通过影响细胞葡萄糖转运体的表达水平、胞内葡糖代谢效率、胰岛β细胞的功能等过程进而影响机体糖代谢水平。miRNAs还通过与相关脂代谢调节基因3’UTR互补结合调控基因表达,对脂代谢进行调控。硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin-interacting protein,TXNIP),又称维生素 D3 上调蛋白 1(vitamin D3 up-regulated protein 1,VDUP1),硫氧还蛋白结合蛋白 2(thioredoxin binding protein 2,TBP2),分子量约 50 kDa。TXNIP 具有调节细胞内氧化还原状态、抑制细胞增殖,促凋亡和衰老功能。TXNIP基因缺失小鼠表现出脂质代谢紊乱,具有高脂血症和肝脂肪变性特征。有研究表明,TXNIP对肝脂质代谢中脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FASN)、固醇调节元件结合蛋白 1c(sterol regulatory element binding protein1c,SREBP1c)、过氧化物酶体增殖剂激活受体(peroxisome proliferators-activated receptors,PPARs)等基因发挥了关键的调控作用。利用miRNAs预测网站进行生物信息学分析得出,TXNIP可能是miR-302a靶基因;我们选取miR-302a和TXNIP为研究靶点,研究miR-302a可能通过抑制TXNIP表达,参与肝脂质代谢。首先,我们证实了 TXNIP是miR-302a的靶基因;其次,通过体内和体外实验,在非酒精性脂肪肝细胞和动物模型中,证实了 miR-302a可通过影响TXNIP的表达调控肝脂质代谢。利用PCR、western blot等相关技术检测TXNIP及与其相关如FASN、PPARα、SREBP1c、磷酸烯醇式丙酮酸竣激酶(phosphoenolpyruvate carboxykinade,PEPCK)等脂代谢调控基因的表达。此外,我们还利用油红染色以及HE染色技术检测了肝脏/肝细胞中脂肪堆积程度及组织形态变化。miR-302a过表达会导致TXNIP表达水平下降,PPARα和PEPCK表达也随之下降,SREBP1c和FASN表达增加,加剧肝脏/肝细胞脂质积累,干扰了正常脂代谢的进行。敲降miR-302a后,TXNIP表达升高,PPARα、PEPCK表达也随之增加,SREBP1c和FASN表达减少,促进肝脏/肝细胞脂质代谢,延缓了脂肪肝的进程。总结:miR-302a对TXNIP具有转录后调控作用,并可通过TXNIP影响与其相关脂代谢调控因子调节肝脏/肝细胞脂质代谢,为今后脂代谢疾病的治疗提供可能靶点。