【摘 要】
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近年来,人们通过研究非正常外界环境条件对植物的影响,进一步了解DNA修饰模式和转座子以及基因结构之间的关系。对于DNA修饰模式的研究,以甲基化为典型的甲基化与转座子和基
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近年来,人们通过研究非正常外界环境条件对植物的影响,进一步了解DNA修饰模式和转座子以及基因结构之间的关系。对于DNA修饰模式的研究,以甲基化为典型的甲基化与转座子和基因激活成为研究的热点。本实验选取一氧化氮胁迫模拟非正常外界环境,研究该生物胁迫环境下,DNA甲基化变化以及在这种变化下同样产生的基因和转座子激活现象,二者之间的关系。本实验运用Southern Blotting, RT-PCR, Bisulfite Sequencing,以及MSAP等技术,分析一氧化氮胁迫下水稻甲基化模式与转座子和基因激活的关系。通过实验结果表明,一氧化氮特定浓度0.5mM SNP处理水稻后,能定向诱导其发生去甲基化变化,尤其是CpNpG位点的甲基化。同时我们也发现,一些相应的转座子和基因在甲基化降低的情况下发生了表达水平的激活现象。对于杂交中的去甲基化变化的代表转座子和基因我们又进一步用亚硫酸盐测序检测了其启动子区域的甲基化水平,同样发现了甲基化水平的明显降低.对于处理后的单株的后代,我们进行了筛选,事实同样证明甲基化模式的改变在亲本和后代之间发生了很大程度的传递,但是也有个别单株恢复到正常对照水平,并且恢复甲基化水平和恢复表达水平的后代单株没有完全一一对应的关系,所以进一步验证了甲基化变化与基因和转座子的表达没有必然的联系.
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