目的:评定高效液相色谱（HPLC）法测定人血清中替考拉宁浓度的不确定度。方法:HPLC法测定人血清中替考拉宁浓度,分析评定测定精密性、天平称量、工作液制备、血清样品制备、液相色谱仪、提取回收率、标准曲线拟合、对照品纯度、样品均匀性以及温度等因素对结果的影响,计算各因素的相对标准不确定度,最终计算合成标准不确定度和扩展不确定度。结果:当置信概率为95%时,人血清中低(6μg·mL^-1)、中(20μg·mL^-1)、高(50μg·mL^-1)浓度替考拉宁的扩展不确定度分别为U（L）=0.63μg·mL^-1,U（M）=1.87μg·mL^-1,U（H）=5.08μg·mL^-1,其测量结果可分别表示为（6.18±0.63）、（20.74±1.87）、（50.09±5.08）μg·mL^-1。结论:HPLC法测定人血清中替考拉宁浓度的不确定度主要由标准曲线拟合、样品提取过程（特别是低、高浓度）引入。