【摘 要】
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为筛选与弓形虫棒状体蛋白38基因（Rop38）相互作用的宿主细胞蛋白,本研究利用MatchmakerTM Gold酵母双杂交系统,构建了人成纤维细胞（HFF）和人T细胞（CEM.NKR）的c DNA文库,以构建的p G
【机 构】
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中国农科院哈尔滨兽医研究所基础免疫创新团队-密歇根州立大学天然免疫联合实验室
【基金项目】
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兽医生物技术国家重点实验室基本科研业务费项目（SKLVBP201306）
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为筛选与弓形虫棒状体蛋白38基因（Rop38）相互作用的宿主细胞蛋白,本研究利用MatchmakerTM Gold酵母双杂交系统,构建了人成纤维细胞（HFF）和人T细胞（CEM.NKR）的c DNA文库,以构建的p GBKT7-Rop38作为诱饵质粒,采用PEG/Li Ac法转化酵母菌株Y2H,利用表型筛选法检测Rop38的自激活作用并进行酵母双杂交筛选。结果表明,诱饵蛋白在酵母双杂交系统中无毒性和自激活作用,而且通过酵母双杂交筛选共获得29个与Rop38蛋白相互作用的宿主蛋白,其中HFF文库筛选到20个
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