海蓬子盐胁迫初期抑制消减杂交cDNA文库的构建

来源 :江苏农业学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：terrychou

【摘要】

：

为提高缩叶肉质盐生植物海蓬子总RNA和mRNA的质量，将改良CTAB法与Tripure试剂盒方法相结合，从300mg海蓬子发芽后20d的幼苗中成功分离和纯化了高纯度的总RNA和mRNA。并以无NaCl

【作者】

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张大栋马鸿翔吉晓佳周春霖王茂文汤日圣杨永华

【机构】

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江苏省农业科学院农业遗传生理研究所暨江苏省农业生物学重点实验室,南京大学医药生物技术国家重点实验室,江苏沿海地区农业科学研究所

【出处】

：

江苏农业学报

【发表日期】

：

2006年2期

【关键词】

：

盐生植物海蓬子抑制消减抑制杂交 CDNA文库 RNA分离 halophyte suppression subtractive hybridization c

【基金项目】

：

江苏省自然科学基金（BK2003201）,江苏省农业科学院基金（6110530）

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为提高缩叶肉质盐生植物海蓬子总RNA和mRNA的质量，将改良CTAB法与Tripure试剂盒方法相结合，从300mg海蓬子发芽后20d的幼苗中成功分离和纯化了高纯度的总RNA和mRNA。并以无NaCl处理为Driver，以200mmol／LNaCl处理24h、48h、72h的幼苗为Tester，通过cDNA双链的合成及两次PCR扩增，富集到两组处理中差异表达的大小在200～1300bp的cDNA序列，pGEM-T的连接和蓝白斑筛选表明杂交文库滴度和重组率分别达到2，6×10^7和96％，共收集阳

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