【摘 要】
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金属硫蛋白对细胞的环境应激起到重要的调节作用,在重金属离子胁迫下上调表达.然而其具体的表达调节机制并不清楚.本研究从嗜热四膜虫克隆了锌指蛋白基因ZFP1 (TTHERM_ 01002
【机 构】
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山西大学生物技术研究所,化学生物学与分子工程教育部重点实验室,山西太原030006太原科技大学环境与安全学院,山西太原030024;山西大学生物技术研究所,化学生物学与分子工程教育部重点实验室,山西太
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金属硫蛋白对细胞的环境应激起到重要的调节作用,在重金属离子胁迫下上调表达.然而其具体的表达调节机制并不清楚.本研究从嗜热四膜虫克隆了锌指蛋白基因ZFP1 (TTHERM_ 01002770),ZFP1基因无内含子,全长2 160 bp,编码719 aa.构建了ZFP1敲除载体pN-ZFP1,通过同源重组的方法敲除ZFP1基因获得ZFP1敲除的突变细胞.△ZFP1对Cu2+和Cd2+的EC50值分别为53.0 μmol/L和25.3 μmol/L,低于野生型细胞83.1μmol/L和32.8 μmol/L.Cu2+胁迫下,△ZFP1突变细胞中MTT2、MTT3、MTT4和MTT5的转录水平降低,MTT1转录水平上调;Cd2诱导下,MTT4转录水平降低,MTT1、MTT2、MTT3和MTT5的转录水平上调,敲除ZFP1基因影响了细胞对Cu2+和Cd2+的耐受性,ZFP1的缺失导致Cu2和Cd2诱导下金属硫蛋白基因转录水平变化.结果 表明Zfp1参与了金属离子胁迫下嗜热四膜虫金属硫蛋白基因的表达水平.
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