HCV NS5B在人肝癌细胞系Huh7细胞内的表达及活性分析

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【摘要】

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目的为靶向抗HCV药物筛选奠定基础.方法使用脂质体将包含HCV非结构蛋白5B(NS5B)基因的重组载体pcDNA-5B转染至人肝癌细胞系Huh7细胞,分别采用RT-PCR和Western Blot鉴定NS5B

【作者】

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孔令保吴晓玉朱向东刘好桔刘志文王园秀熊舒珺

【机构】

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江西农业大学生物科学与工程学院南昌市发酵应用技术重点实验室,南昌,330045

【出处】

：

山东医药

【发表日期】

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2009年35期

【关键词】

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丙型肝炎病毒 NS5B Huh7细胞表达活性

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目的为靶向抗HCV药物筛选奠定基础.方法使用脂质体将包含HCV非结构蛋白5B(NS5B)基因的重组载体pcDNA-5B转染至人肝癌细胞系Huh7细胞,分别采用RT-PCR和Western Blot鉴定NS5B mRNA和蛋白表达,采用荧光素酶试验检测NS5B细胞内RNA依赖的RNA聚合酶(RdRp)活性.结果转染的Huh7细胞出现1.8 kb的特异性NS5B mRNA目的带及一条相对分子质量约66 kD的蛋白目的带,且后者具有细胞内RdRp活性.结论人肝癌细胞系Huh7细胞可成功表达具有细胞内RdRp活性的NS5B,以其为靶标的抗HCV药物可为临床治疗提供新思路.

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