【摘 要】
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目的获得能够过表达小眼畸形相关转录因子（mitf）的重组腺相关病毒载体,用于mitf基因突变相关疾病的基因治疗。方法利用PCR扩增获得目的基因,构建携带目的基因mitf的重组腺相关
【机 构】
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福建医科大学附属第一医院耳鼻咽喉-头颈外科,解放军总医院耳鼻咽喉头颈外科
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目的获得能够过表达小眼畸形相关转录因子（mitf）的重组腺相关病毒载体,用于mitf基因突变相关疾病的基因治疗。方法利用PCR扩增获得目的基因,构建携带目的基因mitf的重组腺相关病毒载体,利用人工脂质体法将p AAV-RC,p Helper,以及p AAV-GFP系列载体转染到HEK293细胞中,采用细胞内质粒DNA同源重组法进行重组腺相关病毒载体构建,利用柱纯化法纯化病毒载体,q PCR法测定重组腺相关病毒载体滴度,病毒载体感染HEK293细胞进行病毒有效性及安全性鉴定,real-time PCR与w
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