【摘 要】
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目的:评价原壳小球藻对6种常用抗生素的敏感性,找到合适的抗生素作为藻株遗传改造的抗性标记.方法:在固体培养基中筛选最适合用于原壳小球藻筛选的抗生素,然后在液体培养基中
【机 构】
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上海交通大学农业与生物学院食品科学与工程系 陆伯勋食品安全研究中心 上海200240
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目的:评价原壳小球藻对6种常用抗生素的敏感性,找到合适的抗生素作为藻株遗传改造的抗性标记.方法:在固体培养基中筛选最适合用于原壳小球藻筛选的抗生素,然后在液体培养基中加入不同浓度的抗生素,分别在第4天,第7天,第14天和第21天测定藻液的OD440值并计算抗生素对藻的生长抑制率(P％).根据抑制率(P％)与抗生素浓度(C)的关系来评估原壳小球藻对抗生素的敏感性.结果:经过2周的筛选试验,在固体培养基中,潮霉素的致死剂量为20μg/mL,链霉素、卡那霉素、壮观霉素、氯霉素的致死剂量分别超过100、500、100、600 ug/mL.而在G418质量浓度为5ug/mL时,原壳小球藻的生长就受到显著的抑制；当质量浓度为10 ug/mL时已经完全抑制了原壳小球藻的生长,因此,对于G418而言,10 ug/mL是原壳小球藻生长的致死剂量.在液体培养基中,G418的作用剂量与固体培养基中的剂量一致,并且5ug/mL对原壳小球藻生长的抑制率维持在80％以上,10ug/mL对原壳小球藻生长的抑制率维持在95％左右.结论:原壳小球藻对氯霉素不敏感,对卡那霉素、链霉素、壮观霉素较为敏感,对潮霉素表现出高度敏感性,对G418最敏感.与其它5种抗生素相比,G418更适合作为原壳小球藻遗传转化的抗生素抗性选择标记.
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