【摘 要】
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目的 建立汉滩病毒(Hantaanvirus,HTNV)微基因组系统,并进行初步评价。方法 用分子克隆方法构建HTNV微基因组系统所需的微基因组质粒和表达核衣壳蛋白(nucleocapsid protein,
【机 构】
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空军军医大学基础医学院学员队; 空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室;
【基金项目】
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陕西省社会发展重点研发计划一般项目(2017SF-166); 病原微生物生物安全国家重点实验室开放课题(SKLPBS1834); 高校自主课题(2018JSTS03)
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目的 建立汉滩病毒(Hantaanvirus,HTNV)微基因组系统,并进行初步评价。方法 用分子克隆方法构建HTNV微基因组系统所需的微基因组质粒和表达核衣壳蛋白(nucleocapsid protein, NP)、RNA依赖的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase, RdRp)的辅助质粒,转染HEK-293T细胞;并在辅助病毒添加与否的情况下进行验证。结果 成功构建了基于HTNV L片段非编码区的绿色荧光蛋白(green fluorescence protein, GFP)和Gaussia荧光素酶(gaussia luciferase, Gluc)的微基因组质粒,GFP微基因组在辅助病毒HTNV感染的情况下可观察到明显绿色荧光,Gluc微基因组在辅助病毒感染或者辅助质粒共转染情况下均可检测到Gluc的表达。结论 成功建立了HTNV的微基因组系统,为研究HTNV的复制机理和抗病毒药物的筛选提供了重要工具。
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