重组鸭γ-干扰素抗血清制备

来源 :扬州大学学报:农业与生命科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：sharongd

【摘要】

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参照大肠埃希菌密码子的偏好性,对GenBank中发布的鸭γ-干扰素基因序列进行密码子优化,人工合成后连接至原核表达载体pET-30a-ELP;将重组表达质粒pET-30a-DuIFNγ-ELP转化到

【作者】

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王永娟郭艳丽吴植王安平郭长明吴双洪伟鸣秦枫朱

【机构】

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江苏农牧科技职业学院/江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室,南京师范大学生命科学学院

【出处】

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扬州大学学报:农业与生命科学版

【发表日期】

：

2019年5期

【关键词】

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鸭 Γ-干扰素原核表达抗体 duckinterferon-gammaprokaryotic expressionantibody

【基金项目】

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江苏省高校自然科学研究重大项目(19KJA520008),江苏省现代农业产业技术体系专项[CX(19)3005],江苏省农业科技自主创新资金重大项目[CX(18)1004],江苏省现代产业体系建设专项(JATS[2018]238)

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参照大肠埃希菌密码子的偏好性,对GenBank中发布的鸭γ-干扰素基因序列进行密码子优化,人工合成后连接至原核表达载体pET-30a-ELP;将重组表达质粒pET-30a-DuIFNγ-ELP转化到大肠埃希菌BL21 (DE3)中, IPTG诱导表达制备DuIFNγ-ELP;通过SDS-PAGE切胶方法得到纯化的DuIFNγ-ELP;纯化产物免疫小鼠后收获血清,用Western blot验证免疫血清的特异性,并用ELISA法检测其特异性抗体滴度。结果表明:重组鸭γ-干扰素基因能成功表达,重组蛋白大小约为7

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