【摘 要】
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本文旨在建立快速获取豚鼠耳朵成纤维细胞的方法,为豚鼠体细胞重编程技术提供起始细胞。首先采用0.05%Trypsin-EDTA和Collagenase IV两种消化酶对脱毛后的耳朵组织碎块进行消
【机 构】
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华南理工大学医学院,广东省心血管病研究所,中国科学院广州生物医药与健康研究院,中南大学湘雅三医院
【基金项目】
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国家重点研发计划项目(2018YFA0108700,2017YFA0105602),国家自然科学基金重点国际(地区)合作与交流项目(81720102004),国家自然科学基金面上项目(81570279),广东省自然科学基金研究团队项目(2017A030312007),"攀登计划"广东大学生科技创新培育专项项目(pdjh2018a0041),广东省人民医院"登峰计划&q
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本文旨在建立快速获取豚鼠耳朵成纤维细胞的方法,为豚鼠体细胞重编程技术提供起始细胞。首先采用0.05%Trypsin-EDTA和Collagenase IV两种消化酶对脱毛后的耳朵组织碎块进行消化;然后对获取的细胞进行体外培养和形态学观察,支原体检测,Vimentin蛋白免疫荧光鉴定,测定细胞生长曲线计算细胞倍增时间;用绿色荧光蛋白的逆转录病毒感染后用流式细胞仪检测感染效率,核型鉴定检测病毒对核型的影响。分离的豚鼠耳朵成纤维细胞为贴壁生长细胞,消化后2~3h即大部分贴壁并基本完全伸展,细胞呈梭形或多角形,胞
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