【摘 要】
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本文用鸟枪法将恶性疟原虫基因组 DNA 片段克隆至载体 pBR_(322)质粒中,利用抗性遗传标志和琼脂糖凝胶电泳筛选重组克隆,克隆 pBF_8,pBF_(13),pBF_(23),pBF_(24)用 HindⅢ酶
【机 构】
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山东省寄生虫病防治研究所,山东省寄生虫病防治研究所,中国科学院遗传研究所,中国科学院遗传研究所,
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本文用鸟枪法将恶性疟原虫基因组 DNA 片段克隆至载体 pBR_(322)质粒中,利用抗性遗传标志和琼脂糖凝胶电泳筛选重组克隆,克隆 pBF_8,pBF_(13),pBF_(23),pBF_(24)用 HindⅢ酶解后,均显示单一插入片段,分子大小分别为1.8,2.3,0.94和6.0kb。经 Southern Blot 和 Dot Blot 分析表明,克隆 pBF_(13)对恶性疟原虫基因组 DNA 特异,与人 DNA 无交叉性杂交,可用作诊断用探针。
In this paper, we cloned P. falciparum genomic DNA fragment into plasmid pBR_ (322) using shotgun method. The recombinant clones were screened by using resistant genetic markers and agarose gel electrophoresis. Clones pBF_8, pBF_ (13), pBF_ (23), pBF_ (24) After digestion with HindIII, all showed a single insert with molecular sizes of 1.8, 2.3, 0.94 and 6.0 kb, respectively. Southern Blot and Dot Blot analysis showed that the cloned pBF_ (13) was specific to P. falciparum genomic DNA and had no crossover with human DNA and could be used as a diagnostic probe.
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