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目的建立大量生产骨骺软骨细胞的培养方法和保存方法,为组织工程骺软骨的培养提供种子细胞.方法2周龄兔胫骨上端骨骺软骨经机械剪切和化学消化后,接种、培养及液氮冻存.通过显微镜观察其生物学表现,并通过蕃红花"O"染色和Ⅱ型胶原免疫组化染色对其生物学特征进行鉴定.结果在体外观察到了骨骺软骨细胞从静止、增殖到肥大这个近似体内的生长过程,经多次传代后增殖能力降低,经过冻存的细胞生物学特征不变.蕃红花"O"和Ⅱ型胶原免疫组化染色阳性.结论我们成功地建立了骨骺软骨细胞的培养和冻存方