猪STING多克隆抗体的制备及应用研究

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:troy0215
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
干扰素基因刺激因子(STING)是天然免疫信号通路环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)-STING中重要的衔接蛋白,它能够识别细胞内第二信使环磷酸鸟苷-腺苷(c GAMP),激活I型干扰素(IFN-I)的表达。为了制备猪STING(pSTING)多克隆抗体(ppSTING)并对其初步应用,本研究利用PCR方法扩增pSTING基因构建重组表达质粒pGEX-6p1-pSTING,转化大肠杆菌BL21(DE3)并经IPTG诱导后经SDS-PAGE和western blot方法鉴定GSTpSTING蛋白(rpSTI
其他文献
为对微小牛蜱烯醇酶(Enolase)基因进行真核表达及免疫反应原性分析,本研究采用RT-PCR方法扩增微小牛蜱Enolase基因的开放阅读框(ORF)序列,将其克隆至pFastBac1载体中构建重组质粒pFastBac1-Enolase,随后转化至大肠杆菌DH10Bac细胞中制备了重组杆粒Bacmid-Enolase,转染至SF9细胞以获得重组Enolase蛋白。通过双酶切、PCR及测序鉴定显示Enolase基因正确插入。利用SDS-PAGE分析表达产物,结果显示目的蛋白大小约为48 ku。利用weste
【目的】研究饲料中添加不同水平小肽对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)幼虾生长、抗氧化能力、非特异性免疫和肠道菌群结构的影响。【方法】在基础饲料中分别添加质量分数0.0%、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%的小肽(分别记为L0、L1、L2、L3、L4、L5组),配制6种等氮等脂饲料,饲喂初始体质量(0.47±0.01)g凡纳滨对虾期8周,测定对虾生长性能、抗氧化、非特异性免疫指标;提取肠道样品总基因组DNA,进行16S rDNA扩增、测序,分析肠道菌群结构。【结果】在饲料
为研究宿主因子紫外线抵抗相关基因(UVRAG)影响狂犬病病毒(RABV)感染的机制,本研究在HEK293细胞中干扰或过表达UVRAG后感染表达mCherry蛋白的重组RABV(rERA-mCherry),于感染后不同时间(24 h、48 h、72 h、96 h)检测上清中病毒的滴度并绘制病毒的生长曲线。结果显示,与转染对照siControl的细胞相比,干扰UVRAG的表达再感染RABV后不同时间细胞上清中的病毒滴度均显著降低(p<0.01),表明干扰UVRAG的表达后抑制RABV的复制能力;而过表达
为制备和筛选副猪嗜血杆菌(HPS)具有免疫保护效力的抗原因子重组蛋白,本研究根据GenBank中已登录HPS基因序列,设计引物,分别克隆其OapA、Hps0675(包括全片段和2个子片段)、Hsp60、OmpP2、HbpB、GAPDH、Hps06257和D15抗原因子的10个基因片段,分别将其克隆入pET28a质粒构建重组表达质粒并转化大肠杆菌BL21经IPTG诱导表达。SDS-PAGE检测结果显示,除OapA外,其他9个重组蛋白均正确表达,其表达量占菌体总蛋白的10.20%~31.90%。除rGAPDH
为评价金黄色葡萄球菌(S. aureus)Csa1A、Hlɑ和EsxA-B蛋白的免疫保护作用,本研究构建了重组质粒p GEX-4T-2-Csa1A、pET-22b-Hlα、pGEX-4T-2-EsxA-B并分别转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导并利用相应层析柱纯化后,采用SDS-PAGE检测重组蛋白的表达。结果显示,获得了纯度较高的重组蛋白Csa1A(rCsa1A)、Hlɑ(r Hlɑ)和EsxA-B(r EsxA-B),纯度分别为89%、95%、85%,大小分别为54 ku、33 ku和39
糖尿病下肢缺血是一种严重的糖尿病并发症,可导致下肢感染、溃疡和坏死,严重时甚至需要截肢。传统治疗和外科治疗在临床上亦有诸多局限性,随着以干细胞治疗为主的再生医学兴起,为糖尿病下肢缺血的治疗带来新的可能性。糖尿病下肢缺血的干细胞治疗中最引人瞩目的是间充质干细胞(MSC)。MSC是一类具有多向分化潜能且低免疫原性的细胞,通过向患者种植,可以改善患者下肢缺血症状、调节免疫,提升患者的生存质量。本文通过对不同组织来源的MSC治疗糖尿病下肢缺血研究进展及研究新方向进行总结,以期为该病的治疗提供理论依据,并对未来的研
本文利用1961-2020年全国31个主要城市代表气象站点的温度资料对城市逐次热浪事件的热浪期间温度、热浪发生时间、热浪持续天数以及年均热浪天数的年代际变化特征进行了分析.结果 表明:综合来看,热浪期间平均温度最高的地区是华南、华东和华中地区;从月尺度看,中国热浪发生最早的地区是华南和西南地区的部分城市,华中和华东的部分城市开始的最晚;从持续时间看,中国南方城市的热浪持续时间普遍比北方长,且南方地区出现超长热浪事件的概率更高,多个城市出现了超过20d的超长热浪.年代际分析表明,近50a来多数城市热浪天数呈
创伤性脑损伤(TBI)是导致死亡和残疾的主要原因之一.随着干细胞治疗与再生医学的发展,间充质干细胞(MSCs)移植治疗TBI改善颅脑神经功能障碍成为可能.目前研究显示,MSCs的神经保护作用之一是基于分泌多种生物活性物质,其中细胞外囊泡(EVs)起到一定的治疗作用.MSC-EVs作用机制可能与神经保护,调节免疫应答,促进血管生成,增加神经发生、保护血脑屏障有关.本文主要介绍MSC-EVs在治疗TBI中的研究进展.
Journal of Systematics and Evolution (JSE) established Awards of JSE Outstanding Papers in 2014 to recognize the most significant research published in JSE in a specific year (Ge &Wen,2015).Since 2015,JSE has awarded papers each year in two categories (tw
期刊
期刊