【摘 要】
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目的:探讨靶向抑制survivin 表达对喉癌细胞凋亡和增殖的影响.方法:构建survivin反义RNA表达载体.用脂质体转染技术将重组质粒转染人喉癌细胞株Hep-2,利用G418(300 g/L的维持
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目的:探讨靶向抑制survivin 表达对喉癌细胞凋亡和增殖的影响.方法:构建survivin反义RNA表达载体.用脂质体转染技术将重组质粒转染人喉癌细胞株Hep-2,利用G418(300 g/L的维持浓度)筛选,获得稳定转染株(HpEGFP/survivin).用Western-blot检测survivin 反义RNA封闭survivin后蛋白表达效果.吖啶橙染色和流式细胞仪、四唑盐(MTT)和软琼脂集落形成实验分别检测HpEGFP/surivin的凋亡和增殖状态的改变,并与Hep-2和转染空载体的细胞(HpEGFP-C1)进行比较.结果:Western-blot结果表明,构建的survivin反义RNA表达载体部分抑制了Hep-2 survivin蛋白的表达.转染反义survivin RNA载体的HpEGFP/survivin较Hep-2和HpEGFP-CI凋亡增多,其凋亡率较空载体对照组增加1.81倍,而其增殖力下降(P＜0.01),软琼脂集落形成能力也明显下降(P＜0.05).结论:构建的survivin反义RNA表达载体部分抑制survivin蛋白的表达,并拮抗了survivin基因的抗凋亡作用,抑制喉癌细胞体外增殖能力和生存能力.
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