RNA干扰抑制STAT1基因表达对食管癌细胞放射生物效应影响

来源 :中华放射肿瘤学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:heishenggg
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目的 利用RNA干扰技术抑制人食管癌细胞(ECA109)信号转导与转录活化因子1(STAT1)基因表达,观察其对放射敏感性和细胞周期影响.方法 针对基因STAT1设计构建干扰质粒pSTAT1-shRNA,与慢病毒包装质粒混合后共同转染293T细胞,收集病毒液感染ECA109细胞.采用RT-PCR和蛋白印迹法测定STAT1在mRNA水平和蛋白水平的表达,采用克隆形成实验和流式细胞术检测ECA109细胞放射敏感性和周期分布.结果 空白对照、转染阴性、转染阳性细胞的D0值分别为2.98、3.02、2.03,SF2分别为0.88、0.88、0.83,Dq值分别为1.39、1.57、1.20.4 Gy照射后12、24、48 h转染阳性细胞比空白对照和转染阴性细胞的G1+Go期比例增高(34.13%∶22.03%∶22.27%、43.80%∶ 28.40%∶ 28.63%、53.20%∶ 42.2%∶ 41.83%,F=7.56、10.01、10.73,P=0.023、0.012、0.010)和G2+M期比例降低(14.33%∶32.23%∶ 32.23%、27.73%∶43.53%∶44.00%、14.23%∶27.97%∶ 27.93%,F=16.86、26.62、40.34,P=0.003、0.001、0.000).结论 RNA干扰不影响ECA109细胞的增殖活性,可能是通过调节照射后细胞周期分布来增加放射敏感性。

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