口蹄疫病毒实时定量RT-PCR方法的建立及初步应用

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为分析口蹄疫病毒(FMDV)在细胞培养物中的复制动态,本实验以18S rRNA 为内参基因,建立检测FMDV 3D 基因的SYBR Green I实时定量RT-PCR (qRT-PCR)方法,以双标准曲线法分析细胞总RNA中FMDV基因组当量(GE/μg)的方法,结果表明所建立的qRT-PCR方法最小检出量为101.5 TCID50/0.1 mL,模板稀释度在107范围内呈良好的线性关系,与其他病毒无交叉反应。应用该方法测定了亚洲1型FMDV兔化弱毒ZB(att)株和其体外拯救病毒vZB株的感染细胞后的复
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