【摘 要】
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目的:构建肝再生磷酸酶-3(phosphatase of regenerating liver-3,PRL-3)基因过表达的重组慢病毒载体,研究其对结直肠癌细胞系HCT116迁移、侵袭能力的影响.方法:PCR扩增PRL-3
【机 构】
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中国人民解放军空军军医大学唐都医院骨科,陕西 西安 710032 中国人民解放军空军军医大学药学系生物制药学教研室 陕西 西安 710032;中国人民解放军空军军医大学药学系生物制药学教研室 陕西 西
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目的:构建肝再生磷酸酶-3(phosphatase of regenerating liver-3,PRL-3)基因过表达的重组慢病毒载体,研究其对结直肠癌细胞系HCT116迁移、侵袭能力的影响.方法:PCR扩增PRL-3基因并克隆至pcDH载体,构建成pcDH-PRL-3过表达载体,再将其与慢病毒包装载体共转染293T细胞,包装成Lenti-PRL-3重组慢病毒载体,并感染结直肠癌细胞系HCT116.利用qPCR、Western分别从mRNA、蛋白水平检测PRL-3表达情况;通过划痕实验、Transwell实验研究过表达PRL-3对结直肠癌细胞系HCT116侵袭能力的影响.结果:成功构建Lenti-PRL-3重组慢病毒载体,并在结直肠癌细胞系HCT116过表达.划痕实验、Transwell实验结果表明过表达PRL-3能够促进HCT116细胞的迁移、侵袭.结论:构建Lenti-PRL-3重组慢病毒载体,在结直肠癌细胞系HCT116过表达PRL-3后能增加细胞的迁移、侵袭能力.
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