【摘 要】
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目的通过检测bcl-2及c-Met基因在表皮生长因子受体（EGFR）基因不同突变类型的肺癌细胞株中的表达，初步探讨bcl-2及c-Met基因与非小细胞肺癌（NSCLC）耐药的相关性。方法采用直接测序法验证A549、HCC827和H1975细胞中EGFR基因突变情况；免疫细胞化学法检测bcl-2及c-Met的蛋白表达水平；反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测bcl-2 mRNA水平；突变扩增阻滞系
【机 构】
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130012 长春，吉林省肿瘤医院胸部肿瘤内科,130012 长春，吉林省肿瘤医院肿瘤转化医学实验室,130012 长春，吉林省肿瘤医院胸部肿瘤内科,130012 长春，吉林省肿瘤医院肿瘤转化医学实验
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目的通过检测bcl-2及c-Met基因在表皮生长因子受体（EGFR）基因不同突变类型的肺癌细胞株中的表达，初步探讨bcl-2及c-Met基因与非小细胞肺癌（NSCLC）耐药的相关性。
方法采用直接测序法验证A549、HCC827和H1975细胞中EGFR基因突变情况；免疫细胞化学法检测bcl-2及c-Met的蛋白表达水平；反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测bcl-2 mRNA水平；突变扩增阻滞系统（ARMS）法检测人恶性胸腔积液中EGFR基因突变情况。
结果直接测序法证实A549细胞为EGFR野生型，HCC827细胞为EGFR外显子19del突变，H1975细胞为EGFR 21外显子L858R与20外显子T790M双突变。免疫细胞化学染色结果显示c-Met及bcl-2蛋白均定位在细胞质，其阳性表达强度从高到低依次为HCC827、A549和H1975细胞。RT-PCR结果显示bcl-2 mRNA在HCC827和A549细胞中高表达（10.93±1.90、7.13±1.33），与H1975细胞（0.83±0.15）相比，差异均有统计学意义（P=0.013，P=0.000）；然而bcl-2 mRNA表达水平与恶性胸腔积液脱落细胞中EGFR基因突变类型无关。
结论HCC827细胞（EGFR 19del）中bcl-2与c-Met基因和蛋白表达水平明显高于H1975细胞（EGFR L858R/T790M），EGFR不同的突变类型可能与不同的信号通路相关。
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