【摘 要】
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目的 探讨尿毒症晚期糖基化终产物(AGEs)和蛋白结合溶质(AOPP)通过抑制Krüppel-样因子2(KLF2)诱导腹膜间皮细胞(PMC)功能障碍的机制.方法 采用MTT法分别检测不同浓度的AGEs
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目的 探讨尿毒症晚期糖基化终产物(AGEs)和蛋白结合溶质(AOPP)通过抑制Krüppel-样因子2(KLF2)诱导腹膜间皮细胞(PMC)功能障碍的机制.方法 采用MTT法分别检测不同浓度的AGEs和AOPP对人腹膜间皮细胞的抑制率;采用实时定量PCR(q-PCR)法测定AGEs和AOPP对人腹膜间皮细胞中KLF2和转化生长因子β1(TGF-β1)的mRNA表达;采用蛋白免疫印迹(Western Blot)法测定AGEs和AOPP对人腹膜间皮细胞中上皮-间叶转化(EMT)相关蛋白Ⅰ型胶原(Collagen Ⅰ)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的蛋白表达.结果 不同浓度的AGEs(0～120 mM)和AOPP(0～120 mM)均对人腹膜间皮细胞的增殖具有一定的抑制作用,并且80mM AGEs和60 mM AOPP的抑制效果最显著(P<0.01),后续实验将人腹膜间皮细胞分组为正常对照(Control)组、80mM AGEs处理(AGEs)组和60mM AOPP处理(AOPP)组.与正常对照组相比,AGEs组和AOPP组人腹膜间皮细胞中KLF2的mRNA表达降低(P<0.01).与正常对照组相比,AGEs组和AOPP组人腹膜间皮细胞中TGF-β1的mRNA表达增加(P<0.01).与正常对照组相比,AGEs组和AOPP组人腹膜间皮细胞中Collagen Ⅰ、α-SMA的蛋白表达上调(P<0.01),而E-cadherin的蛋白表达下调(P<0.01).结论 尿毒症晚期糖基化终产物和蛋白结合溶质均可通过抑制Krüppel-样因子2上调TGF-β1、Collagen Ⅰ和α-SMA的表达,下调E-cadherin的表达,诱导人腹膜间皮细胞的上皮-间叶转化,进而导致人腹膜间皮细胞功能障碍.
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