【摘 要】
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将正交因素试验与GUS基因组织化学染色等技术相结合,优化大豆（Glycine max）品种东农50遗传转化体系,导入抗旱关键基因Mt DREB2A。结果表明,大豆种子表面消毒,NaClO溶液法与Cl2
【机 构】
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北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室;
【基金项目】
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转基因生物新品种培育重大专项(No.2009ZX08009-089B-4)
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将正交因素试验与GUS基因组织化学染色等技术相结合,优化大豆（Glycine max）品种东农50遗传转化体系,导入抗旱关键基因Mt DREB2A。结果表明,大豆种子表面消毒,NaClO溶液法与Cl2气熏蒸法的去污染率分别达到98.67%和93.33%。子叶节法转GUS基因组织化学染色率（68.33%）显著高于下胚轴法（14.00%）和胚尖法（0.67%）（P<0.05）。种子萌发5天,农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）培养温度25°C,OD600=0.9,共培养5天的转GUS基因子叶节最高达72.00%;恢复培养5天,草丁膦(3 mg·L–1)、头孢噻肟钠(200 mg·L–1)和羧苄青霉素(300 mg·L–1)筛选诱导分化的转GUS基因不定芽最多为3.33%;优化的大豆遗传转化体系转化效率为1.11%。转Mt DREB2A基因大豆东农50植株根系更加密集,主根长度和侧根数量均显著高于对照（P<0.05）,证实Mt DREB2A基因具有促进大豆根系生长的作用,为利用该基因进行大豆抗旱育种奠定了坚实的基础并提供了理论依据。
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