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目的：应用PCR扩增真菌ITS2区基因，结合基因测序法对痰标本中分离的60株真菌进行病原学鉴别。方法：收集痰标本分离的真菌菌落60份及2种真菌标准菌株（白色念珠菌，烟曲霉菌）培养菌落，分别提取基因组DNA，半巢式PCR扩增ITS2区，扩增产物经测序后，结果与NCBI基因库中的核酸序列进行比对，确定致病菌的种属，并对其分布特征进行分析。结果：2种真菌标准菌株的ITS2区基因序列比对结果与种属一致。痰标本中60株真菌测序鉴定结果为：曲霉菌属24株（其中烟曲霉菌17例、黑曲霉菌3例、黄曲霉菌2例、土曲霉菌1例、