【摘 要】
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通过同源克隆法从花魔芋抗病植株中得到抗软腐病基因的同源片段,为筛选魔芋抗软腐病基因提供了科学依据.根据已知植物NBS-LRR类抗病基因同源序列(RGA)的保守区域设计简并引物
【机 构】
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三峡大学,生物技术研究中心,宜昌,443002
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通过同源克隆法从花魔芋抗病植株中得到抗软腐病基因的同源片段,为筛选魔芋抗软腐病基因提供了科学依据.根据已知植物NBS-LRR类抗病基因同源序列(RGA)的保守区域设计简并引物,从抗软腐病花魔芋植株的基因组DNA与cDNA上得到抗病基因同源片段(RGAs),并对其结构进行分析.从抗软腐病花魔芋植株基因组中分离得到了一条500 bp的NBS-LRR类抗病基因同源序列,共获得6条特异序列,分别命名为RGAR1、RGAR2、RGAR3、RGAR4、RGAR5、RGAR6,6条魔芋RGAs在氨基酸水平上的同源性表现出多态性,序列相似性分析结果表明,这些魔芋抗病基因同源序列均包含P-loop、Kinase-2、Kinase-3及疏水结构域HD等保守结构域,与已知的抗病基因在氨基酸水平上的同源性为33％～63％.通过构建系统进化树分析,将这6个序列分为3个亚组,均属于TIR-NBS-LRR类抗病基因.在花魔芋上成功获得了抗病基因同源序列,将为魔芋中抗病基因的克隆、功能分析及定位等提供帮助.
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