【摘 要】
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目的:研究加味小陷胸汤对人胃癌MGC803细胞上皮间质转化(EMT)抑制作用及与分泌型糖蛋白Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)通路关系.方法:采用人胃癌MGC803细胞悬液种植法构建BALB/c裸鼠皮下异位移植性肿瘤动物模型.造模成功后随机分为模型组、加味小陷胸汤低、中、高剂量组(16.0,32.0,64.0g·kg-1),卡培他滨组(400 mg· kg-1),每组8只,灌胃给药,每日1次,连续给药28d,其中卡培他滨组给2周停l周.观察裸鼠一般状态、体质量,测量移植瘤大小,处死后称质量
【机 构】
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安徽中医药大学,合肥230012;安徽中医药大学,合肥230012;安徽省中医药科学院中西医结合研究所,合肥230012;中药复方安徽省重点实验室,合肥230012
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目的:研究加味小陷胸汤对人胃癌MGC803细胞上皮间质转化(EMT)抑制作用及与分泌型糖蛋白Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)通路关系.方法:采用人胃癌MGC803细胞悬液种植法构建BALB/c裸鼠皮下异位移植性肿瘤动物模型.造模成功后随机分为模型组、加味小陷胸汤低、中、高剂量组(16.0,32.0,64.0g·kg-1),卡培他滨组(400 mg· kg-1),每组8只,灌胃给药,每日1次,连续给药28d,其中卡培他滨组给2周停l周.观察裸鼠一般状态、体质量,测量移植瘤大小,处死后称质量并计算抑瘤率;苏木素-伊红(HE)染色法观察移植瘤组织病理学变化;用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Wntl,β-catenin的基因和蛋白表达水平及Western blot检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9),血管内皮生长因子(VEGF),N-钙黏蛋白(N-cadherin),E-钙黏蛋白(E-cadherin),波形蛋白(Vimentin),锌指蛋白(Snail)蛋白表达水平:酶联免疫吸附测定(ELISA)检测环氧合酶2(COX2),前列腺素E2(PGE2)的表达水平.结果:各组移植瘤体积随时间呈现不同的增长趋势,模型组增长趋势最为明显,与模型组比较,加味小陷胸汤低、中、高剂量组、卡培他滨组瘤体积呈现不同程度的生长抑制、增长趋势降低,且随时间延长作用明显,给药7,14,21,28d加味小陷胸汤低、高剂量组、卡培他滨组移植瘤体积明显降低(P＜0.05,P＜0.01),给药14,21,28 d加味小陷胸汤中剂量组移植瘤体积显著降低(P＜0.01).与模型组比较,给药7,14,21,28 d,加味小陷胸汤高剂量组、卡培他滨组裸鼠移植瘤相对肿瘤体积显著降低(P＜0.01),给药14,21,28 d,加味小陷胸汤低、中剂量组移植瘤相对肿瘤体积明显降低(P＜0.05,P＜0.01).与模型组比较,加味小陷胸汤低、中、高剂量组、卡培他滨组移植瘤抑瘤率显著升高(P＜0.01).与模型组比较,加味小陷胸汤中低、中、高剂量组、卡培他滨组均能下调瘤组织Wnt1,β-catenin mRNA和蛋白的表达(P＜0.05,P＜0.01)及MMP-9,VEGF,N-cadherin,Vimentin,Snai1的蛋白表达(P＜0.05,P＜0.01),上调E-cadherin蛋白的表达(P＜0.05,P＜0.01);降低COX2,PGE2含量(P＜0.05,P＜0.01).结论:加味小陷胸汤对人胃癌MGC803细胞移植瘤EMT具有抑制作用,其机制可能与Wnt/β-catenin通路有关.
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