【摘 要】
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目的探讨miR-141对口腔鳞状细胞癌(OSCC)CAL27细胞增殖活性的影响及其与Eph A2的靶向关系。方法构建pre-miR-141、Eph A2野生型(Eph A2-WT)和突变型(Eph A2-MT)真核表达载体,
【机 构】
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天津医科大学第二医院口腔科,济宁市第一人民医院口腔科
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目的探讨miR-141对口腔鳞状细胞癌(OSCC)CAL27细胞增殖活性的影响及其与Eph A2的靶向关系。方法构建pre-miR-141、Eph A2野生型(Eph A2-WT)和突变型(Eph A2-MT)真核表达载体,采用实时定量PCR(qRTPCR)检测pre-miR-141的转染效率。用MTT检测细胞增殖活性,用双荧光素酶报告基因检测、qRT-PCR和Western blot验证miR-141与Eph A2的靶向关系。结果 pc DNATM6.2-GW-pre-miR-141、pmir GLO-Eph A2-WT和pmir GLO-Eph A2-MT表达载体构建成功,转染pre-miR-141的CAL27细胞miR-141的表达显著升高(P<0.001)。miR-141过表达能够明显抑制CAL27细胞的增殖(P<0.05),共转染pre-miR-141和Eph A2-WT的CAL 27细胞其荧光活性显著下降(P<0.001),转染pre-miR-141的CAL27细胞其Eph A2的表达要显著低于转染空质粒组(P<0.001),miR-141的过表达能够显著抑制Eph A2的蛋白表达水平。结论 miR-141的过表达可能通过靶向下调Eph A2的表达从而抑制OSCC的增殖。
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