人全长PLCr 1基因真核表达载体的构建及鉴定

来源 :第一军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：watersss1111

【摘要】

：

目的构建人全长PLCr1基因真核表达载体，以便进一步研究PLCr1的作用及其机制。方法自行设计一对带有日砌Ⅲ和Not Ⅰ酶切位点的引物，采用RT-PCR技术从MG63细胞中扩增人全长PLCr1

【作者】

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李秀梅邓凡曾位森华亮陆地李明王宏刘忠英罗深秋

【机构】

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第一军医大学细胞生物学教研室

【出处】

：

第一军医大学学报

【发表日期】

：

2004年8期

【关键词】

：

PLCr1基因真核表达载体 RT-PCR 构建鉴定 PLCγ1 gene eukaryotic expression vector reverse tran

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目的构建人全长PLCr1基因真核表达载体，以便进一步研究PLCr1的作用及其机制。方法自行设计一对带有日砌Ⅲ和Not Ⅰ酶切位点的引物，采用RT-PCR技术从MG63细胞中扩增人全长PLCr1 cDNA(3878bp)，纯化后，经HindⅢ-NotⅠ酶切，插入真核表达载体pLNCX2中，构建重组质粒pLNCX2／PLCr1。通过PCR，限制性酶切分析及DNA直接测序对所构建的重组质粒进行鉴定。同时经瞬时转染后，利用RT-PCR及Western blotting转染后LoVo细胞中PLCr1的表达。结果RT

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