利用正交试验设计优化桂花的SSR-PCR体系

来源 :江苏农业科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：chen406507025

【摘要】

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以潢川金桂DNA为SSR-PCR扩增模板,采用L16（4^5）正交设计对Taq酶用量、Mg^2＋浓度、模板DNA用量、dNTPs浓度以及引物浓度在4个水平上进行了优化,建立了桂花SSR-PCR反应的最佳体系,

【作者】

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王萍母洪娜耿兴敏杨秀莲王良桂

【机构】

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南京林业大学风景园林学院

【出处】

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江苏农业科学

【发表日期】

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2017年2期

【关键词】

：

桂花 SSR-PCR 体系优化正交设计

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以潢川金桂DNA为SSR-PCR扩增模板,采用L16（4^5）正交设计对Taq酶用量、Mg^2＋浓度、模板DNA用量、dNTPs浓度以及引物浓度在4个水平上进行了优化,建立了桂花SSR-PCR反应的最佳体系,即在10μL反应体系中,不同成分的最佳含量为酶0.2U、Mg^2＋ 3.0、模板DNA40ng、dNTPs 0.60、引物0.8μmol/L.应用最佳体系对引物Off50进行退火温度的优化,得到最适退火温度范围为60-62℃.

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