CRISPR/Cas9系统靶向敲除多溴蛋白1基因对肝癌细胞功能的影响

来源 :临床内科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huangxiaojie33
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目的探讨应用规律成簇的间隔短回文重复(CRISPR)/CRISPR相关蛋白9(Cas9)系统靶向敲除多溴蛋白1(PBRM1)基因对肝癌细胞功能的影响。方法应用CRISPR/Cas9系统靶向敲除Huh7细胞的PBRM1基因。采用Sanger测序和蛋白质印迹法(Western blot)检测基因敲除情况。基于转录本测序(RNA-seq)结果,对Huh7敲除(KO)细胞株与Huh7野生(WT)细胞系差异表达基因进行功能富集。采用流式细胞术分析细胞周期的改变。通过CCK-8法和克隆形成实验研究细胞增殖情况。采用不
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