【摘 要】
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目的:旨在观察不同茎部长度串联shRNA表达载体对EGFP基因的干扰作用.方法:采用体外培养的Vero细胞,选用不同茎部长度串联shRNA表达载体+EGFP表达载体+脂质体转染的方法,将构
【机 构】
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湖北省农业科学院畜牧兽医研究所、湖北省胚胎工程与分子育种重点实验室,西北农林科技大学动物医学学院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目,湖北省国际合作项目,动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室开放课题
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目的:旨在观察不同茎部长度串联shRNA表达载体对EGFP基因的干扰作用.方法:采用体外培养的Vero细胞,选用不同茎部长度串联shRNA表达载体+EGFP表达载体+脂质体转染的方法,将构建好的干扰载体转染Vero细胞,然后使用实时荧光定量RT-PCR对其沉默效应进行定量分析.在小鼠腿部肌肉注射干扰质粒,实时荧光定量RT-PCR对其沉默效应进行定量分析.结果:转染Vero细胞时,pGenesilR21、pGenesilR27和pGenesilR29荧光表达量仅为对照质粒pEGFP-C1的4.3%、3.0%
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